OsSHN1和OsMYB48參與水稻木質(zhì)素合成調(diào)控的研究.pdf

1、苯丙烷代謝途徑是植物中廣泛存在的重要次生代謝途徑，通過(guò)該途徑可以合成種類繁多的次生代謝產(chǎn)物。其中，木質(zhì)素作為途徑中產(chǎn)生的重要代謝產(chǎn)物，對(duì)于農(nóng)業(yè)、工業(yè)和環(huán)境有重要的影響。目前，水稻中木質(zhì)素的合成調(diào)控研究較少，本研究發(fā)現(xiàn)了水稻中一個(gè)ERF家族轉(zhuǎn)錄因子和MYB轉(zhuǎn)錄因子參與水稻木質(zhì)素調(diào)控途徑，這對(duì)于研究水稻木質(zhì)素的合成調(diào)控提供了重要的研究參考依據(jù)。以下是一系列實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　1.在OsSHN1超表達(dá)材料中檢測(cè)木質(zhì)素合成途徑的結(jié)構(gòu)基因表達(dá)量

2、，發(fā)現(xiàn)木質(zhì)素合成結(jié)構(gòu)基因表達(dá)量相對(duì)于野生型材料ZH11出現(xiàn)下降;而在OsSHN1抑制材料中檢測(cè)木質(zhì)素合成的結(jié)構(gòu)基因，木質(zhì)素結(jié)構(gòu)基因表達(dá)量呈上升趨勢(shì)。
　　2.選取野生型材料和RNAi抑制材料，間苯三酚染色發(fā)現(xiàn):在RNAi抑制材料中，染色程度比野生型材料要深，表明在抑制材料中木質(zhì)素含量的積累比野生型高。采用溴乙酰方法測(cè)定水稻秸稈木質(zhì)素含量，測(cè)定結(jié)果表明:在OsSHN1抑制材料中，木質(zhì)素含量比野生型材料中的木質(zhì)素含量高。
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3、.通過(guò)凝膠遷移實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):OsSHN1轉(zhuǎn)錄因子能夠結(jié)合到木質(zhì)素重要合成結(jié)構(gòu)基因OsCAD2的啟動(dòng)子上，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，OsSHN1與OsCAD2啟動(dòng)子上的GCC-box發(fā)生結(jié)合從而導(dǎo)致OsSHN1蛋白能夠與OsCAD2發(fā)生調(diào)控。
　　4.OsMYB48基因超表達(dá)后，發(fā)現(xiàn)木質(zhì)素結(jié)構(gòu)基因表達(dá)量呈明顯上調(diào)表達(dá)趨勢(shì)，同時(shí)，OsMYB48基因受ABA等非生物脅迫不同程度誘導(dǎo)表達(dá)。進(jìn)一步染色觀察可知，OsMYB48超表達(dá)材料中木質(zhì)素含量積累比野