光誘導(dǎo)c-fos基因在母雞中腦的表達(dá).pdf

1、本試驗(yàn)用c-fos法探討光信息在母雞中腦的傳導(dǎo)通路，為深入了解光照對(duì)母雞生產(chǎn)性能的影響機(jī)理打下基礎(chǔ)。在養(yǎng)雞生產(chǎn)中，光照是雞賴以生存的環(huán)境中的重要因素之一；科學(xué)利用光照可以進(jìn)一步提高雞的生產(chǎn)性能，如:促進(jìn)雞的生長發(fā)育，調(diào)節(jié)性成熟，提高產(chǎn)蛋率、受精率、種蛋合格率等。禽類是最依賴視覺系統(tǒng)的脊椎動(dòng)物。鳥類的視覺系統(tǒng)主要分為兩個(gè)平行的視覺信息加工通路:離頂蓋通路(the tectofugal pathway:視網(wǎng)膜-視頂蓋-圓核-外紋體)和離丘腦

2、通路(the thalamofugal pathway:視網(wǎng)膜-丘腦主視核和丘腦背外側(cè)復(fù)合體-視廳)；而對(duì)于禽類來說，離頂蓋通路遠(yuǎn)比離丘腦通路重要的多。在雞腦離頂蓋視覺通路中，光刺激是否引起不同神經(jīng)元的功能活動(dòng)；哪些神經(jīng)元參與某一特定光信息的傳遞，這些問題還有待于進(jìn)一步研究。 光線通過雞的眼睛，刺激視網(wǎng)膜，經(jīng)視神經(jīng)葉的視神經(jīng)途徑傳到丘腦下部或直接透過顱骨到達(dá)松果體及丘腦下部，下丘腦產(chǎn)生和分泌促性腺激素釋放激素(Gonadotro

3、phin Releasing Hormone，GnRH)，再通過垂體門脈系統(tǒng)傳至腦下垂體前葉，引起促卵泡激素(Follicle Stimulating Hormone，F(xiàn)SH)和促黃體激素(Lutenizing Hormone，LH)的分泌，LH和FSH協(xié)同促進(jìn)卵泡成熟，促進(jìn)卵巢分泌雌二醇。這些激素共同構(gòu)成支配生殖機(jī)能的內(nèi)分泌體系，影響生殖器官的發(fā)育；促使卵泡生長發(fā)育和排卵。但光信息在神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)部通過怎樣的途徑和方式對(duì)雞下丘腦一垂體一性

4、腺軸起調(diào)節(jié)作用，目前還不清楚。 腦中神經(jīng)元間的聯(lián)系錯(cuò)綜復(fù)雜，利用常規(guī)的神經(jīng)束路追蹤標(biāo)記物方法不能對(duì)光信息通路進(jìn)行完全的描繪，因?yàn)槠湟话悴荒芸缟窠?jīng)元傳遞。但即早基因c-fos可通過跨突觸活化作用誘導(dǎo)表達(dá)，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)接受內(nèi)外刺激后，c-fos的表達(dá)產(chǎn)物Fos蛋白可作為單一神經(jīng)元應(yīng)答的分辨標(biāo)記。 c-fos原癌基因是一種即刻早基因(immediately early gene，IEG)，耦連細(xì)胞外信息與細(xì)胞內(nèi)靶基因的轉(zhuǎn)錄，

5、被稱為核內(nèi)“第三信使”(third messengr)；普遍存在于神經(jīng)中樞系統(tǒng)(Central Nervous System,CNS)，正常情況下高度保守，表達(dá)水平很低，難以檢測，在受刺激的情況下可以迅速發(fā)生一過性表達(dá)。c-fos基因的表達(dá)可作為腦對(duì)包括光照在內(nèi)的各種刺激起反應(yīng)的標(biāo)志物。疼痛刺激誘導(dǎo)c-fos基因在鴨脊髓的表達(dá)作為光誘導(dǎo)c-fos基因在母雞中腦的表達(dá)的免疫組化陽性對(duì)照；從而對(duì)Fos蛋白的分布、形態(tài)有初步的認(rèn)知。光誘導(dǎo)c-

6、fos基因在母雞中腦的表達(dá)試驗(yàn):將雞右眼遮光7天后接受20 lx的光照刺激1.5h，暗適應(yīng)1.5h后灌流固定，取腦制作石蠟切片，采用免疫組化方法和Westem Blot的方法檢測c-fos基因在中腦的表達(dá)。結(jié)果顯示:中腦內(nèi)有大量Fos樣免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元，主要見于左側(cè)，分布于中腦SGC層、峽核大細(xì)胞部(Nucleus isthmi pars magnocellularis，Imc)和小細(xì)胞部(Nucleus isthmi pars pa

7、rvocellularis，Ipc)、峽視核(Nucleus isthmo-opticus，ION)、半月核(Nucleus Semilunaris，SLu)、中腦外側(cè)核背側(cè)部(Nucleus mesencephalicus lateralis pars dorsalis，MLd)、紅核(Nucleus raphes，RN)、滑車神經(jīng)核(Nucleus nervitrochlearis，nIV)。中腦兩側(cè)峽核的Fos樣免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元