感染期子宮頸癌U14細胞荷瘤小鼠抑制巨噬細胞CCL5分泌的機制研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學學位論文使用授權及知識產(chǎn)權歸屬承諾本學位論文在導師(或指導小組)的指導下，由本人獨立完成。本學位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權歸河北醫(yī)科大學所有。河北醫(yī)科大學有權對本學位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學位論文主要內(nèi)容相關的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權均歸河北醫(yī)科大學所有。否則，承擔相應法律責任。珊螻轢伊刷程導河北醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指導下進行的

2、研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責自負。研究生簽名’彳少≥導師簽章：勿t工年；月名。日中文摘要感染期子宮頸癌U14細胞荷瘤小鼠抑制巨噬細胞CCL5分泌的機制研究摘要目的：探討感染期子宮頸癌U14細胞荷瘤小鼠抑制巨噬細胞分泌正常T細胞表達和分泌趨化因子5(RANTES／CCL5)的機制。方法：取68周齡的雌性C57BL／

3、6小鼠，隨機分為4組，每組6只。無瘤組：皮下注射培養(yǎng)基；荷瘤組：皮下注射U14細胞；無瘤脂多糖(LPS；用于誘導小鼠感染)組：皮下注射培養(yǎng)基，腹腔內(nèi)注射LPS；荷瘤LPS組：皮下注射U14細胞，腹腔內(nèi)注射LPS。l采用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)法及熒光定量PCR(QPCR)技術檢測各組小鼠血清及炎性細胞中CCL5和前列腺素2(PGE2)的表達。2提取感染期荷瘤小鼠血清制備腫瘤條件培養(yǎng)基(TCM)，在體外誘導巨噬細胞，檢測誘導感染前、

4、后各組上清液和巨噬細胞中CCL5、PGE2和環(huán)磷酸腺苷(cAMP)的表達。3選用環(huán)氧化酶2(COX2)抑制劑一NS一398阻斷PGE2的產(chǎn)生，檢測誘導感染前、后各組上清液和巨噬細胞中CCL5、PGE2和環(huán)c—心佃的表達。4選用蛋白激酶A(PKA)阻滯劑H89阻斷cAMP／PKA信號通路，檢測各組上清液和巨噬細胞中PGE2、CCL5和cAⅧ的表達。結果：1荷瘤組小鼠血清中CCL5蛋白含量及巨噬細胞中CCL5mRNA的表達水平(151343

5、5355pg／ml：1)均明顯低于無瘤組(6908184852pg／ml；4530848)，差異均有統(tǒng)計學意義(P005)。其血清中PGE2蛋白含量及巨噬細胞中PGE2mRNA的表達水平(119849士8273lpg／ml；575士0777)均明顯高于無瘤組(1868425455pg／ml；1)，差異均有統(tǒng)計學意義(P005)。無瘤LPS組小鼠血清中CCL5蛋白含量及巨噬細胞中CCL5mRNA的表達水平(404934士141421pg／