乳腺癌癌周浸潤轉移過程中VEGF、Flt-4及p53表達及意義.pdf

1、背景與目的：近幾年來研究發(fā)現有多種生長因子及其受體在乳腺癌中表達，分別由腫瘤細胞、浸潤細胞、血管內皮細胞及細胞外基質產生，對乳腺癌血管生成、轉移、預后有重要作用。乳腺癌的侵襲性生長及其轉移主要依賴于血管和淋巴管的生成，血管和淋巴管不僅提供了腫瘤生長所需要的營養(yǎng)，而且也是癌細胞播散的途徑。目前認為腫瘤組織中血管形成的發(fā)生主要是由于腫瘤組織細胞、巨噬細胞及內皮細胞等產生的血管生成因子與抑制因子的失衡，導致了血管內皮細胞分裂增生和微血管生成，

2、同時微血管的通透性增加。而這其中血管內皮生長因子(vascularendothelial growth factor，VEGF)是目前所知作用最強的促血管內皮生長的細胞因子，是對血管內皮細胞的特異性生長因子，對血管內皮細胞的促有絲分裂作用十分強烈，也是目前發(fā)現的最強的增加血管通透性的物質之一，其刺激血漿蛋白如纖維蛋白的滲出，并在細胞外基質沉積，成為腫瘤基質和新生的毛細血管網絡基礎，從而促進了腫瘤組織中血管的大量生成。而VEGF家族中的V

3、EGF-C及其特異性受體Flt-4是特異性的淋巴管內皮細胞生長因子，可通過促進腫瘤新生淋巴管形成和/或淋巴管的擴張，直接或間接促進腫瘤的轉移。因為腫瘤血管和淋巴管形成可能是多基因、多因素共同參與的結果，所以p53基因的突變或失活可能影響VEGF、Flt-4在乳腺癌中的表達，對乳腺癌的發(fā)生發(fā)展及轉移發(fā)揮一定的作用。隨著世界范圍內對乳腺癌的手術治療呈縮小趨勢，“保留乳房的乳腺癌切除術”在越來越多的早期乳腺癌患者中廣泛應用。如何選擇合適的手術

4、切除范圍并指導術后的輔助治療方式顯得格外重要。乳腺癌保乳手術局部復發(fā)和遠處轉移是目前乳腺外科探討的重點之一。乳腺癌的局部浸潤發(fā)生最早并影響淋巴和血行轉移，繼而關系到局部治療方式的選擇和局部控制效果。保乳手術時不同病理分型及分期的病人切除范圍尚無定論，手術的切除范圍影響復發(fā)率，尋找與局部復發(fā)和遠處轉移相關的危險因子更顯得尤為重要。但直至目前，乳腺癌腫瘤邊緣至切緣的距離，至今尚無一致意見。本實驗主要通過觀測乳腺癌癌周浸潤距離的大小，繼而把V

5、EGF、Flt-4及p53在乳腺癌及癌周組織中的表達的情況進行分析，探討其與乳腺癌的組織學類型及分期、腫瘤大小、腋窩淋巴結轉移、雌孕激素受體等的關系，闡明vEGF、Flt-4及p53與乳腺癌癌周浸潤深度的關系，從而篩選出浸潤深度相關因子，指導手術切除范圍以及預測腫瘤局部復發(fā)和遠處轉移。方法：選取44例乳腺癌標本，經處理后沿標本周邊平均四個方向分別完整切取一塊腫瘤連同其周邊正常乳腺及結締組織進行常規(guī)H&E染色切片。光鏡下觀察癌周邊四個方向

6、不同范圍內的乳腺和結締組織內有無癌浸潤，計算距離癌邊緣的距離為浸潤深度，以癌浸潤最遠距離計算。然后選取癌周浸潤最遠距離的切片所對應的石蠟切片作免疫組織化學染色，以檢測VEGF、Flt-4及p53在乳腺癌及癌周組織中的表達情況，同時觀察10個400倍視野下Flt-4陽性淋巴管個數。評估VEGF、Flt-4及p53的表達與乳腺癌癌周浸潤程度和轉移等的關系。采用單因素方差分析與等級資料秩和檢驗，應用SPSS12.0統(tǒng)計軟件，P值取<0.05有

7、顯著性差異。 結果： (1) 44例乳腺癌浸潤距離最遠為13mm。浸潤癌巢直徑30～400Hm，中位11Oμm。浸潤距離與腫塊大小無顯著關系，但與組織學類型有顯著關系。(2) VEGF與Flt-4的表達強度在早期浸潤癌、浸潤性導管癌與乳頭狀癌間差異均有非常顯著性，其在分化程度低的腫瘤中表達強度明顯高于分化程度高的腫瘤。Flt-4與腫瘤分期、ER、PR受體表達及淋巴結轉移有明顯關系，但是VEGF與上述指標關系不大。(3)VEGF

8、與Flt-4在腫瘤實體的表達越強，其腫瘤的浸潤能力越強，其生長浸潤的距離越遠，p53表達則與癌周浸潤無明顯關聯。Flt-4陽性淋巴管數在浸潤距離遠的腫瘤中高于浸潤距離近的腫瘤。其在淋巴結轉移陽性組中的表達水平明顯高于淋巴結表達陰性組。 (4) 癌組織VEGF、Flt-4及p53的表達強度均明顯高于癌周正常乳腺組織，距離癌腫區(qū)越遠，以上各因子的表達強度越低。VEGF、Flt-4及p53在近癌區(qū)與中距離區(qū)、遠癌區(qū)、癌周正常組織表達差異均有顯

9、著性。中距離區(qū)與遠癌區(qū)、癌周正常組織比較差異有顯著性，遠癌區(qū)與癌周正常組織比較差異無顯著性。 (5) p53表達的強度與VEGF、Flt-4表達的強度均有顯著關聯，而VEGF表達的強度與Flt-4表達的強度也存在顯著關聯。結論： (1)VEGF與Flt-4在乳腺癌中表達水平與乳腺癌的惡性程度和浸潤能力相關，二者的高表達促進癌周的局部浸潤；Flt-4及其陽性淋巴管的高表達還可能與乳腺癌的淋巴結轉移相關。(2)P53基因的突變或失活促使了V

10、EGF的表達，腫瘤新生血管生成；P53基因的突變或失活是乳腺癌發(fā)生與發(fā)展的早期事件并且貫穿乳腺癌發(fā)展的整個過程，對腫瘤發(fā)生發(fā)展及轉移發(fā)揮一定的作用。 (3)距離乳腺癌邊緣>1.3cm是保乳手術時的“相對安全距離”，保乳手術時需切除腫瘤邊緣至少1.5cm正常組織，可有效降低癌殘留率，同時可能降低腫瘤局部復發(fā)及遠處轉移的機會。但無需將切除范圍擴大到>3cm，需結合個體差異和臨床指標進行選擇。(4)VEGF與Flt-4可為臨床上早期預測乳腺癌