乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中P-gp、GST-π、ToPoⅡa、TS的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：乳腺癌的常用治療手段包括手術(shù)、放療、化療、內(nèi)分泌治療等。其中化療能夠降低乳腺癌患者術(shù)后局部復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率，仍是目前治療乳腺癌主要的輔助手段。但由于腫瘤對(duì)藥物的原發(fā)性耐藥，乳腺癌患者對(duì)化療的敏感性差別很大。腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥(multidrug resistance，MDR)是直接影響化療效果的主要原因。MDR是指由一種藥物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥后，腫瘤細(xì)胞不僅對(duì)引起耐藥的原藥耐藥，同時(shí)對(duì)其他多種結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制完全不同的藥物產(chǎn)生交叉

2、耐藥的現(xiàn)象。腫瘤細(xì)胞MDR的產(chǎn)生與多種機(jī)制有關(guān)。 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)常規(guī)形態(tài)觀察和免疫組織化學(xué)染色等方法，檢測(cè)56例乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中多藥耐藥基因表達(dá)產(chǎn)物P糖蛋白(P-gp)以及谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GST-π)、拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(ToPo Ⅱa)、胸苷酸合成酶(TS)的表達(dá)情況，同時(shí)結(jié)合c-erbB-2的表達(dá)，探討它們?cè)谌橄侔┙M織中的表達(dá)情況及其與腫瘤大小、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理參數(shù)的關(guān)系。 方法：采用河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院

3、病理科2004-2007年間存檔的乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌標(biāo)本56例，同時(shí)選取乳腺腺病及乳腺纖維腺瘤各10例良性病變作為對(duì)照，將所有蠟塊連續(xù)切片(4μm)十一張，進(jìn)行常規(guī)HE染色和免疫組織化學(xué)染色。利用特異性抗體檢測(cè)不同基因蛋白P-gp、GST-π、ToPo Ⅱa、TS、c-erbB-2的表達(dá)情況。免疫組織化學(xué)染色采用SP法，DAB顯色。本研究中采用的免疫組化顯色系統(tǒng)為DAB顯色系統(tǒng)，陽(yáng)性結(jié)果為在相應(yīng)的部位顯示棕黃色顆粒。P-gp陽(yáng)性顆粒分布于

4、胞膜、胞漿；GST-π陽(yáng)性顆粒分布于胞漿；TS陽(yáng)性顆粒位于胞漿；ToPoⅡα陽(yáng)性顆粒分布于胞核；c-erbB-2顆粒分布于胞膜，以細(xì)胞膜呈清晰的棕黃色為陽(yáng)性，僅胞漿內(nèi)和胞核內(nèi)著色不作陽(yáng)性判斷依據(jù)。 隨機(jī)計(jì)數(shù)10個(gè)高倍視野的癌細(xì)胞，P-gp、GST-π、TS、c-erbB-2以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<10％為陰性，10～25％為(+)，25～75％(++)；ToPo Ⅱα要求記數(shù)細(xì)胞數(shù)目為500或1000個(gè)，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞的百分率，據(jù)此分為四級(jí)

5、：Ⅰ級(jí)陰性，陽(yáng)性細(xì)胞<25％；Ⅱ級(jí)(++)陽(yáng)性細(xì)胞25％-49％；Ⅲ級(jí)(+++)陽(yáng)性細(xì)胞50％～74％；Ⅳ級(jí)(++++)陽(yáng)性細(xì)胞≥75％。 判斷標(biāo)準(zhǔn)以P-gp、GST-π、TS、c-erbB-2≥兩個(gè)加號(hào)具有診斷價(jià)值：ToPo Ⅱα≤一個(gè)加號(hào)具有診斷價(jià)值。 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包。 結(jié)果：在乳腺癌組織和對(duì)照的良性乳腺病變組織內(nèi)，P-gp、GST-π、ToPo Ⅱα、TS、c-erbB-2均有不

6、同程度的表達(dá)。 1.P-gp的表達(dá)：乳腺癌組織內(nèi)P-gp的陽(yáng)性表達(dá)率為46％(26/56)，對(duì)照組陽(yáng)性率為7/20(35％)，其表達(dá)率在二組間無(wú)顯著差異(P>0.05)。P-gp表達(dá)與乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者性別、年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小、TNM分期無(wú)明顯關(guān)系(P>0.05)。 2.GST-π的表達(dá)：56例乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中GST-π陽(yáng)性率為62％(35/56)，對(duì)照組為3/20(15％)。表達(dá)率在二組間有顯著差異(P<0

7、.01)。統(tǒng)計(jì)分析表明GST-π的表達(dá)與患者的年齡、腫瘤大小、臨床分期無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，僅與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者GST-π陽(yáng)性率71％(27/38)高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者44％(8/18)，二組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 3 TS的表達(dá)：對(duì)照組TS陽(yáng)性率為1/20(5％)。在56例乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織內(nèi)的陽(yáng)性表達(dá)率為43％(24/56)，其表達(dá)率在二組間組有顯著差異(P<0.01)。TS的表達(dá)與患者的年齡、腫瘤大小、臨

8、床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 4 ToPoⅡα的表達(dá)：56例乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織內(nèi)的陽(yáng)性率為64％(36/56)，在對(duì)照組中陽(yáng)性率為15/20(75％)，其表達(dá)率在二組間無(wú)顯著差異(P>0.05)。本研究統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明ToPo Ⅱα的表達(dá)與患者的年齡、腫瘤大小無(wú)關(guān)，但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期有關(guān)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者ToPo Ⅱα陽(yáng)性率55％(21/38)低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者83％(15/18)，二組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

9、義(P<0.05)。ToPo Ⅱα陽(yáng)性率與臨床分期有關(guān)，臨床分期越高其表達(dá)率越低，臨床分期Ⅰ、Ⅱ之間表達(dá)無(wú)差別，臨床分期Ⅰ+Ⅱ與Ⅲ表達(dá)率有差別(P<0.05)。 5 c-erbB-2的表達(dá)：可見(jiàn)棕黃色顆粒分布于胞膜上。c-erbB-2主要表達(dá)在良性病變的乳腺導(dǎo)管和腺上皮細(xì)胞以及乳腺癌內(nèi)的癌細(xì)胞胞膜。c-erbB-2在乳腺癌中陽(yáng)性率為43％(24/56)，在對(duì)照組中陽(yáng)性率為2/20(10％)，其表達(dá)率在二組間有顯著差異(P<0.0

10、1)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析c-erbB-2陽(yáng)性率與與患者的年齡、腫瘤大小無(wú)關(guān)，但是與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 6.Pg-p、GST-π、TS、ToPoⅡα、c-erbB-2相關(guān)性分析56例乳腺癌組織P-gp、GST-π、TS、ToPoⅡα、c-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)率分別為：46％，62％，43％，64％，43％；20例對(duì)照中分別為：35％、15％、5％、75％、10％。P-go、ToPoⅡα的表達(dá)率在二組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05

11、)，GST-π、TS、c-erbB-2表達(dá)差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 乳腺癌組織中P-gp和GST-π、TS、ToPoⅡα、c-erbB-2的表達(dá)有相關(guān)性(X2為8.106，P<0.05)。 結(jié)論：檢測(cè)乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織內(nèi)P-gp和GST-π、TS、ToPoⅡα的表達(dá)對(duì)腫瘤化療藥物的選擇具有重要臨床意義；耐藥蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期等相關(guān)。 1.P-gp、ToPoⅡα在乳腺癌中的表達(dá)率與良性病變