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文檔簡介
1、目的:研究潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)患者外周血中Th17細(xì)胞(CD4+IL-17A+T細(xì)胞)與Treg細(xì)胞(CD4+CD25+CD127lowT細(xì)胞)數(shù)量及其相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子和細(xì)胞因子的表達(dá)水平,分析Th17/Treg比例失衡在UC發(fā)病中的作用及其臨床意義。
方法:抽取實驗組UC(50例)與對照組結(jié)腸鏡檢查未示異常(30例)患者的外周靜脈血,流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,F(xiàn)CM)檢測
2、外周血Th17和Treg細(xì)胞比例;逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)檢測外周血單個核細(xì)胞Th17細(xì)胞重要轉(zhuǎn)錄因子RORγt mRNA和Treg細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3 mRNA的表達(dá)水平;酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測人血清細(xì)胞因子IL-17A、IL-6、IL-23、
3、TGF-β1的表達(dá)。
結(jié)果:1.FCM檢測結(jié)果顯示,UC患者外周血中Th17細(xì)胞比例明顯高于正常對照組(7.49±1.95Vs2.14±0.84,P<0.05);而Treg細(xì)胞比例顯著低于正常對照組(1.62±0.57Vs4.55±1.21,P<0.05);Th17/Treg較正常對照組明顯升高(5.61±3.18Vs0.50±0.25,P<0.05)。2.RT-PCR檢測結(jié)果顯示,UC患者Th17細(xì)胞主要轉(zhuǎn)錄因子RORγ
4、tmRNA表達(dá)水平明顯高于對照組(1.31±0.17Vs0.74±0.08,P<0.05),而Treg細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3mRNA表達(dá)水平明顯低于對照組(0.33±0.06Vs0.73±0.09,P<0.05),RORγtmRNA/Foxp3mRNA比值較對照組明顯增加(3.99±0.75Vs1.03±0.14,P<0.05)。3.ELISA檢測結(jié)果表明,UC患者血清細(xì)胞因子IL-17A、IL-6、IL-23表達(dá)水平均顯著高于對
5、照組(30.61±4.17Vs17.34±2.53,48.69±5.46Vs15.23±2.12,220.54±76.95Vs114.37±21.78,P<0.05),而TGF-β1表達(dá)水平明顯低于對照組(962.90±213.91Vs1257.05±167.92,P<0.05)。4.Th17細(xì)胞比例與TGF-β1濃度呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.679,P<0.01),而與IL-17A濃度呈顯著正相關(guān)(r=0.757,P<0.01);相反,
6、Treg細(xì)胞比例與TGF-β1濃度呈顯著正相關(guān)(r=0.718,P<0.01),而與IL-17A濃度呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.735,P<0.01)。
結(jié)論:1.UC患者外周血中Th17細(xì)胞及其重要轉(zhuǎn)錄因子RORγtmRNA表達(dá)水平較對照組明顯升高,而Treg細(xì)胞及其特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3mRNA表達(dá)水平則明顯降低,另外Th17/Treg及RORγtmRNA/Foxp3mRNA比值均顯著升高,提示UC患者外周血存在Th17
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