CD40在潰瘍性結腸炎發(fā)病機制中作用的實驗研究.pdf

1、第一部分 CD40在潰瘍性結腸炎組織中的表達及意義
　　目的:研究CD40分子在潰瘍性結腸炎組織中的表達,及其與潰瘍性結腸炎嚴重度之間的相關性。
　　方法:應用免疫組化技術檢測56例潰瘍性結腸炎組織和10例正常組織中CD40分子表達。
　　結果:CD40分子在潰瘍性結腸炎組織中的陽性表達率為62.5％,明顯高于對照組(P<0.05)。與輕度潰瘍性結腸炎相比,CD40陽性表達率在中度潰瘍性結腸炎中明顯升高(P<0.05)

2、。
　　結論:潰瘍性結腸炎患者結腸組織中CD40表達異常。
　　第二部分 抗CD40單克隆抗體在潰瘍性結腸炎中治療效應及作用機制的實驗研究
　　目的：初步探討抗CD40單克隆抗體在葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium,DSS)誘導的小鼠潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis, UC)中的治療效應及作用機制。
　　方法：24只BALB/c小鼠按隨機數(shù)字表分為:A組(對照組,n=6)

3、、B組(模型組,n=6)、C組(奧沙拉秦干預組,n=6)、D組(抗CD40單克隆抗體干預組,n=6)。A組小鼠自由飲用蒸餾水7天;B、C、D組小鼠自由飲用5％DSS溶液7天以制成UC小鼠模型;造模的同時于第1、3、5及7天分別給以A、B組腹腔注射無菌蒸餾水。C組小鼠每天灌服奧沙拉秦(60mg/kg)、D組小鼠于造模第1、3、5、7天腹腔注射抗CD40單克隆抗體(20ug/次),于造模第8天,處死所有各組小鼠。大體觀察各組小鼠疾病活動指數(shù)

4、(disease activity index,DAI),常規(guī)病理切片評估結腸組織病理學評分(histopathological score,HPS)。RT-PCR測定各組小鼠遠端結腸中IFN-γmRNA、TNF-αmRNA的表達,ELISA法測定各組小鼠血清中IFN-γ、TNF-α含量的變化。
　　結果：(1)與對照組DAI(0.29±0.48)和HPS(0.16±0.32)相比,模型組小鼠DAI(6.21±1.25)和HPS(

5、7.00±0.58)明顯增高(p<0.05);與模型組相比,奧沙拉秦干預組C組DAI(4.58±2.36)和HPS(4.35±0.76)均有不同程度的下降(p<0.05);抗CD40單克隆抗體干預組D組DAI(3.98±1.86)和HPS(3.25±0.66)亦有不同程度的下降(p<0.05)。
　　(2)模型組IFN-γmRNA、TNF-mRNA表達量(分別為3.21±0.26、1.23±0.36)明顯高于對照組(分別為1.35

6、±0.18、0.21±0.13)(p<0.05),奧沙拉秦干預后,IFN-γmRNA、TNF-mRNA表達在C組(2.58±0.24、0.72±0.15)、抗CD40單克隆抗體干預組D組(2.34±0.25、0.59±0.18)均顯著下降(p<0.05)。
　　(3)對照組小鼠血清中IFN-γ、TNF-α的水平分別為(215.18±32.51)、(20.06±5.20),模型組小鼠血清中IFN-γ、TNF-α的表達比例分別為(95

7、3.32±40.96)、(42.97±8.76),模型組小鼠血清中IFN-γ、TNF-α的表達比例與對照組相比明顯升高(P<0.05),奧沙拉秦干預后C組、抗CD40抗體干預組D組小鼠血清中IFN-γ、TNF-α的表達比例分別為C組(768.73±31.86)、(37.75±6.75)、D組(693.47±51.38)、(30.93±3.18),與模型組相比干預組均有明顯降低(P<0.05);
　　結論：(1)抗CD40抗體干預組