飼料中谷氨酰胺和核苷酸對半滑舌鰨稚魚生長、消化酶活力、抗氧化酶活力及基因表達(dá)的影響.pdf

1、以35日齡半滑舌鰨（Cynoglossus semilaevis）稚魚為研究對象，共設(shè)計(jì)4種谷氨酰胺添加量分別為0.0％、0.5％、1.0％和2.0％的等氮等脂微顆粒飼料（游離谷氨酰胺實(shí)測值分別為0.03％、0.46％、0.91％、1.73％），6種核苷酸混合物（Sigma; IMP∶ AMP∶ GMP∶ UMP∶ CMP=1∶1∶1∶1∶1）添加量分別為0.000％、0.018％、0.036％、0.054％、0.072％和0.090％

2、的等氮等脂微顆粒飼料，每天飽食投喂5次，在流水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行為期30 d的攝食生長實(shí)驗(yàn)，探究飼料中谷氨酰胺和核苷酸水平對半滑舌鰨稚魚生長性能、消化酶活力、抗氧化能力的影響，并從分子水平上研究谷氨酰胺和核苷酸的作用機(jī)制，主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　1.谷氨酰胺對半滑舌鰨稚魚生長、消化酶活力和IGF-1mRNA表達(dá)的影響。
　　研究結(jié)果表明，飼料中添加0.5％-2.0％谷氨酰胺時(shí)，半滑舌鰨稚魚存活率、終末體長、終末體重和特定生

3、長率顯著高于未添加組(P＜0.05)。隨著飼料中谷氨酰胺添加量增加，腸段胰蛋白酶活力先顯著上升，隨后顯著下降(P＜0.05)，但胰段胰蛋白酶活力在各處理組間差異不顯著(P＞0.05)。腸段和胰段淀粉酶活力在2.0％谷氨酰胺添加組顯著高于未添加組(P＜0.05)。隨著飼料中谷氨酰胺添加量升高，舌鰨稚魚腸道刷狀緣中堿性磷酸酶和亮氨酸氨基肽酶活力呈現(xiàn)先顯著上升隨后趨于平穩(wěn)的變化趨勢(P＜0.05)。隨著飼料中谷氨酰胺添加量增加，舌鰨稚魚內(nèi)臟團(tuán)

4、IGF-1mRNA表達(dá)量顯著上升，2.0％添加組表達(dá)量最高，顯著高于未添加組(P＜0.05)。綜上所述，飼料中添加谷氨酰胺能夠顯著提高舌鰨稚魚存活率和生長性能，增強(qiáng)消化酶活力，激活內(nèi)臟團(tuán)中促進(jìn)生長關(guān)鍵基因IGF-1mRNA表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)中，以SGR進(jìn)行分析，半滑舌鰨稚魚對飼料中游離谷氨酰胺最適需求量為0.63％。
　　2.谷氨酰胺對半滑舌鰨稚魚抗氧化能力和抗應(yīng)激能力的影響。
　　研究結(jié)果表明，飼料中添加2.0％谷氨酰胺時(shí)半滑舌

5、鰨稚魚全魚丙二醛(MDA)含量顯著低于未添加組(P＜0.05)。半滑舌鰨稚魚全魚超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)在各處理組之間差異不顯著(P＞0.05)。谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)活力在0.5％處理組最高，顯著高于2.0％添加組(P＜0.05)。隨著谷氨酰胺添加量增加，舌鰨內(nèi)臟團(tuán)中SOD和GPX mRNA表達(dá)量先顯著上升（P＜0.05），隨后當(dāng)添加量繼續(xù)增加時(shí)表達(dá)量下降，而CAT表達(dá)量變化趨勢和SOD與GPX表達(dá)量變化趨

6、勢相反。當(dāng)飼料中谷氨酰胺添加量為0.5％-1.0％時(shí)，半滑舌鰨稚魚半致死溶氧濃度顯著低于未添加組和2.0％添加組(P＜0.05)。應(yīng)激后舌鰨稚魚內(nèi)臟團(tuán)熱休克蛋白70(HSP70) mRNA表達(dá)量急劇增加，0.5％和2.0％組HSP70 mRNA表達(dá)量顯著高于未添加組（P＜0.05）。綜上所述，飼料中添加谷氨酰胺能夠調(diào)控舌鰨稚魚關(guān)鍵抗氧化酶活力和mRNA表達(dá)量，降低魚體MDA水平，增強(qiáng)舌鰨稚魚抗低氧應(yīng)激能力。
　　3.核苷酸對半滑舌

7、鰨稚魚生長和消化酶活力的影響。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著飼料中核苷酸添加量從0.000％上升到0.018％，舌鰨稚魚存活率顯著上升，當(dāng)添加量超過0.018％后存活率顯著下降(P＜0.05)。不同核苷酸添加水平顯著影響了舌鰨稚魚的生長，添加水平為0.018％-0.054％時(shí)舌鰨稚魚終末體長、終末體重和特定生長率顯著高于未添加組(P＜0.05)。隨著飼料中核苷酸添加量增加，胰段和腸段胰蛋白酶活力、腸段淀粉酶活力先顯著上升，在0.036％

8、添加組達(dá)到最大值，隨后顯著下降(P＜0.05)，胰段淀粉酶活力變化趨勢相似，但在0.054％添加組達(dá)到最大值。飼料中添加核苷酸顯著提高了舌鰨稚魚腸道刷狀緣中堿性磷酸酶和亮氨酸氨基肽酶活力，各添加組之間差異不顯著(P＞0.05)。綜上所述，飼料中添加核苷酸能夠顯著提高舌鰨稚魚存活率和生長性能，增強(qiáng)消化酶活力。以SGR為評價(jià)指標(biāo)，本實(shí)驗(yàn)中半滑舌鰨稚魚核苷酸最適宜添加量為0.018％。
　　4.核苷酸對半滑舌鰨稚魚非特異性免疫相關(guān)酶活力

9、、抗氧化能力和抗低氧應(yīng)激能力的影響。
　　研究結(jié)果表明，飼料中核苷酸添加量為0.018％、0.036％和0.072％時(shí)，半滑舌鰨稚魚全魚MDA含量顯著低于未添加組和0.090％添加組(P＜0.05)。飼料中添加0.018％核苷酸對舌鰨稚魚全魚誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)活力具有一定的提升作用，顯著高于0.0.72％添加組。飼料中不同核苷酸添加水平對溶菌酶(LZM)活力的影響不顯著(P＞0.05)。隨著飼料中核苷酸含量增加，舌鰨稚

10、魚全魚SOD活力先上升隨后下降，0.018-0.054％添加組SOD活力顯著高于其他處理組。除0.036％添加組CAT活力顯著低于未添加組外，其余各組CAT活力無顯著差異。0.018％組SODmRNA表達(dá)量顯著高于未添加組(P＜0.05)，其余各組無顯著差異。核苷酸添加量為0.018-0.036％時(shí)，GPX表達(dá)量顯著低于未添加組(P＜0.05)，而0.018％、0.054％、0.072％和0.090％組CATmRNA表達(dá)量均顯著低于未添