骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞自體移植治療缺血性腦卒中的臨床研究.pdf

1、廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞自體移植治療缺血性腦卒中的臨床研究姓名：譚敏申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：@指導(dǎo)教師：胡志兵20100501廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞自體移植治療缺血性腦卒中的臨床研究2療缺血性腦卒中的臨床療效及安全性，為臨床大力開展BMSCs治療缺血性腦卒中提供臨床依據(jù)。2、研究內(nèi)容和方法本課題研究共分為二部分。第一部分：介紹自體BMSCs實驗室培養(yǎng)及擴增傳代方法步驟，通過Ficoll分離法分離骨髓單個核細(xì)

2、胞（Mononuclearcells，MNCs），體外培養(yǎng)擴增出BMSCs，并通過形態(tài)學(xué)特征及流式細(xì)胞術(shù)檢測其表面標(biāo)志加以鑒定；第二部分：觀察臨床安全性，比較移植前、移植后隨訪3個月及6個月的臨床癥狀，采用NIHSS評分（NationalInstitutesofHealthStrokeScale，美國國立衛(wèi)生院卒中量表）、BI指數(shù)（BarthelIndex，巴氏量表）及FCA量表（Functionalcomprehensiveasses

3、sment，功能綜合評定量表）評價患者神經(jīng)功能及認(rèn)知改變，比較影像學(xué)資料和伴隨疾病的改善情況。3、研究結(jié)果1）、骨髓單個核細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)3～5天時，增殖較慢，成纖維樣貼壁細(xì)胞逐漸出現(xiàn)；8～10天成纖維樣貼壁細(xì)胞增殖較快，細(xì)胞形態(tài)均一可達(dá)到80%融合；14天左右（傳代為第2代時），細(xì)胞生長出現(xiàn)典型的漩渦狀排列，細(xì)胞融合度可達(dá)90%。流式細(xì)胞儀檢測BMSCs表面抗原高表達(dá)CD29、CD105及CD166，而低表達(dá)CD34、CD4及HLA

4、DR等。體外培養(yǎng)傳代到第二代時進(jìn)行流式細(xì)胞標(biāo)志物鑒定為BMSCs。2）、對5位缺血性腦卒中患者進(jìn)行BMSCs靜脈移植，均無寒戰(zhàn)發(fā)熱、皮疹、消化道不適、癲癇等不良反應(yīng)，隨訪3個月及半年內(nèi)無癲癇及腫瘤出現(xiàn)。移植前后臨床表現(xiàn)及查體（包括言語、運動、感覺、認(rèn)知及情感）、NIHSS、BI、FCA評分及影像學(xué)分析提示：失語、神經(jīng)功能、認(rèn)知功能、情感方面及梗塞面積大小均有不同程度的改善，而且對患者的伴有疾病（糖尿病、混合型癡呆、帶狀皰疹后神經(jīng)痛）亦有