間充質(zhì)干細(xì)胞治療缺血性心臟病療效觀察.pdf

1、背景:干細(xì)胞治療缺血性心臟病是近年來再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)作為一種新的細(xì)胞工程的種子細(xì)胞因?yàn)槿〔姆奖?、來源充足、低免疫原性等?yōu)點(diǎn)逐漸被大家接受。隨著研究的不斷深入,許多動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已證實(shí)間充質(zhì)干細(xì)胞移植可改善心肌缺血?jiǎng)游锏男呐K功能及存活率,然而移植后MSCs存活和轉(zhuǎn)化效率低下成為制約其臨床應(yīng)用的瓶頸之一,而關(guān)于臨床人體應(yīng)用后的長(zhǎng)期安全性與有效性也仍然有爭(zhēng)議。這些問題的解

2、決對(duì)于指導(dǎo)MSCs在臨床的應(yīng)用具有十分重要的意義。
　　目的:一是探索快速、簡(jiǎn)單、有效的體外預(yù)處理提高間充質(zhì)干細(xì)胞移植效率的策略。二是觀察間充質(zhì)干細(xì)胞冠脈移植治療缺血性心臟病的安全性及臨床療效。
　　內(nèi)容和方法:根據(jù)以上目的,本研究分成為二個(gè)部分:
　　第一部分過氧化氫預(yù)處理增強(qiáng)脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)小鼠急性心肌梗死的療效制備小鼠皮下脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞(ADMSCs),部分體外200umol/LH2O2預(yù)處理,酶聯(lián)免疫吸

3、附法分別檢測(cè)上清液中HGF、VEGF、IL-6及TNF-α濃度。選取32只8-10周齡小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、心梗(MI)組、ADMSCs組、H2O2預(yù)處理干細(xì)胞(ADMSCs-H2O2)組,結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支制備心梗模型,3小時(shí)后分別經(jīng)鼠尾靜脈移植PBS、ADMSCs(1 106)和ADMSCs-H2O2(1 106)。移植術(shù)后第0、7、14、28天用超聲測(cè)量各組小鼠心功能(LVEDD、LVESD、LVFS);28天心臟取材后稱重計(jì)算

4、心肌肥厚指數(shù),天狼星紅染色檢測(cè)心肌膠原含量,計(jì)算平均膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)。
　　第二部分臍帶華通膠間充質(zhì)干細(xì)胞治療缺血性心臟病臨床療效觀察選擇中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院2010年12月至2012年3月住院的缺血性心臟病心功能不全患者32例,隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組各16例。制備臍帶華通膠間充質(zhì)干細(xì)胞,治療組行冠脈造影,經(jīng)微導(dǎo)管向罪犯血管移植10ml干細(xì)胞懸液(細(xì)胞數(shù)2 107),對(duì)照組行冠脈造影并注射10ml0.9％氯化鈉注射液。治療前

5、、術(shù)后3月及6月分別復(fù)查心電圖與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)觀察治療安全性,復(fù)查超聲心動(dòng)圖評(píng)價(jià)心功能,行SF-36健康量表評(píng)價(jià)生活質(zhì)量,并記錄嚴(yán)重不良臨床事件。
　　結(jié)果:
　　1.H2O2預(yù)處理增強(qiáng)了ADMSCs上清液中HGF、IL-6的濃度,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。心臟超聲示ADMSCs-H2O2組較MI組及ADMSCs組LVESD與LVEDD均明顯下降(P<0.01),而FS值則顯著升高(P<0.01)。ADMSCs-H2O2

6、組心肌肥厚指數(shù)顯著降低,較MI組P<0.000,較ADMSCs組P<0.01;ADMSCs組較MI組CVF明顯降低(P<0.01),而ADMSCs-H2O2組較ADMSCs組CVF進(jìn)一步下降(P<0.05)。
　　2.治療及隨訪期間兩組實(shí)驗(yàn)室檢查及臨床不良事件發(fā)生率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療組術(shù)后3月及6月左室舒張末容量(LVEDV)和左室收縮末容量(LVESV)均較術(shù)前顯著減小,左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)較術(shù)前顯著提高(P<0.05)

7、;對(duì)照組各指標(biāo)無明顯變化。SF-36健康量表評(píng)分治療組與對(duì)照組術(shù)后3月、6月較治療前身體功能及總體健康評(píng)分均有顯著提高(P<0.05),治療組術(shù)后6月較術(shù)后3月評(píng)分改善仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);組間差異比較顯示總體健康評(píng)分二組差異顯著(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、體外H2O2預(yù)處理ADMSCs增強(qiáng)了HGF、IL-6的分泌,移植后較未預(yù)處理ADMSCs進(jìn)一步減輕了心梗后心肌纖維化,心功能改善更為明顯,顯著增強(qiáng)了