醛固酮誘導(dǎo)心肌肥厚大鼠心室組織鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶抑制因子的表達及其意義.pdf

1、心肌肥厚是機體對內(nèi)源性或外源性刺激的代償反應(yīng)。近年來，大量研究表明，多種神經(jīng)內(nèi)分泌因素參與高血壓導(dǎo)致心肌肥厚反應(yīng)，尤其是腎素—血管緊張素—醛固酮系統(tǒng)?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，醛固酮是心肌肥厚的重要誘導(dǎo)因素之一，但其具體發(fā)生機制尚不十分清楚。研究表明，鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(calcineurin，CaN)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在心肌肥厚反應(yīng)發(fā)生發(fā)展過程中，起到至關(guān)重要的作用。同時，機體內(nèi)源性CaN抑制因子(calcineurininhibitor，Cain)在體外實驗

2、中，已經(jīng)被證實可以抑制CaN介導(dǎo)的心肌肥厚反應(yīng)。因而，觀察醛固酮誘導(dǎo)心肌肥厚反應(yīng)是否依賴于CaN信號通路，探討動物體內(nèi)Cain的表達及其意義，對于抑制心肌肥厚的發(fā)生發(fā)展，具有一定的意義。 本研究，①通過皮下注射醛固酮，制造外源性醛固酮增加動物模型，以28只wistar大鼠隨機分成4組：安慰劑組，皮下注射醛固酮組，螺內(nèi)酯灌胃治療組，以及環(huán)孢素A腹腔注射組。②通過“一腎一夾”手術(shù)復(fù)制腎血管性高血壓大鼠心肌肥厚模型，模擬內(nèi)源性醛固酮對

3、大鼠的影響。以28只wistar大鼠隨機分成4組：“一腎一夾”手術(shù)組和假手術(shù)組不予干預(yù)治療，予螺內(nèi)酯灌胃干預(yù)治療組，以及環(huán)孢素A腹腔注射干預(yù)治療組。 兩個模型組分別飼養(yǎng)14天后，測定大鼠血壓，通過放免的方法測定血漿中血管活性因子醛固酮、血管緊張素Ⅱ、神經(jīng)肽Y，取心臟組織，測量全心重/體重(HW/BW)及左心室重/體重(LVW/BW)比值后，采用免疫組化方法觀察心肌組織中Cain的變化，進而通過蛋白印跡雜交(westernblot

4、)方法，測定心肌組織中Cain表達量的變化。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在外源性醛固酮增加模型中，皮下注射醛固酮可以導(dǎo)致大鼠血壓升高，HW/BW和LVW/BW比值、血漿醛固酮含量顯著升高(p＜0.05)，免疫組化分析顯示心肌細胞胞漿中陽性顆粒(Cain)明顯增多，westernblot測定結(jié)果顯示Cain表達量顯著提高(p＜0.05)。而分別給予螺內(nèi)酯、環(huán)孢素A干預(yù)治療組，HW/BW和LVW/BW比值明顯下降、血漿醛固酮及神經(jīng)肽Y含量顯著升高(

5、p＜0.05)，免疫組化觀察到心肌細胞胞漿中陽性顆粒(Cain)明顯減少，進一步行westernblot檢測結(jié)果顯示Cain表達量顯著下降(p＜0.05)。 同樣，在“一腎一夾”腎血管性高血壓大鼠模型中，發(fā)現(xiàn)“一腎一夾”手術(shù)可以導(dǎo)致大鼠血壓升高，HW/BW和LVW/BW比值、血漿醛固酮、血管緊張素Ⅱ含量顯著升高，而血漿神經(jīng)肽Y水平明顯下降(p＜0.05)，免疫組化分析顯示心肌細胞胞漿中陽性顆粒(Cain)明顯增多，western

6、blot測定結(jié)果顯示Cain表達量顯著提高(p＜0.05)。而給予環(huán)孢素A干預(yù)后，HW/BW和LVW/BW比值顯著下降、血漿醛固酮和血管緊張素Ⅱ含量顯著下降、而神經(jīng)肽Y含量升高(p＜0.05)。在螺內(nèi)酯干預(yù)治療組，LVW/BW比值下降、血漿血管緊張素Ⅱ含量顯著下降、而神經(jīng)肽Y含量升高(p＜0.05)。通過免疫組化分析，觀察到心肌細胞胞漿中陽性顆粒(Cain)，在螺內(nèi)酯組及環(huán)孢素A組均顯著減少。進而行westernblot測定，結(jié)果顯示，