胸腺素α-,1-的固相片段合成及鑒定分析.pdf

1、本文以多肽固相化學(xué)合成方法為基礎(chǔ),利用固相片段合成制備胸腺素α<,1>. 首先應(yīng)用固相化學(xué)合成方法制備胸腺素α<,1>的全保護多肽片段中間體,并系統(tǒng)考察了縮合反應(yīng)時間、反應(yīng)溶劑及二氯三苯甲基樹脂的切割條件對合成的全保護片段中間體質(zhì)量的影響,確立了全保護片段中間體的優(yōu)化工藝條件:以DMF為反應(yīng)溶劑,HBTU為縮合劑,1個氨基酸/8h的反應(yīng)速度縮合,采用TFE:HOAc:DCM(體積比)=1:2:7的切割條件進行逐步合成胸腺素α<,

2、1>的全保護多肽片段.應(yīng)用質(zhì)譜(LC/MS)、反相高效液相色譜(RP-HPLC)方法對胸腺素α<,1>的全保護片段進行了鑒定及定量分析.合成的較小片段(少于11個氨基酸)的中間體收率均在90﹪以上,純度均高于93﹪；而較大的多肽片段收率也在83﹪以上,純度在79﹪以上. 片段中間體的制備完成后,應(yīng)用固相片段連接方法合成胸腺素α<,1>,系統(tǒng)研究了設(shè)計方案、片段間縮合的反應(yīng)時間、反應(yīng)溶劑、縮合劑及末端氨基酸乙?；南群箜樞?qū)铣尚?/p>

3、腺素α<,1>質(zhì)量的影響,從而確立了優(yōu)化的固相片段合成胸腺素α<,1>的工藝條件:以DMF:DCM(體積比)=3:1的混合溶液為反應(yīng)溶劑,HATU為縮合劑,1個多肽片段/20h的反應(yīng)速度,采用Acl-10+Fmocll-18+Fmoc19-28-WangResin三段合成的實驗方案,按照先末端氨基酸的乙?；笃伍g縮合的途徑,進行全保護多肽片段連接合成胸腺素α<,1>.合成的粗品經(jīng)LC/MS及RP-HPLC鑒定分析,得到胸腺素α<,1>