斷奶仔豬腸道UCP2表達(dá)與腸道發(fā)育的關(guān)系及NAC的調(diào)控作用.pdf

1、目的：早期斷奶應(yīng)激是仔豬營(yíng)養(yǎng)學(xué)急需解決的重要命題之一。前期研究發(fā)現(xiàn)斷奶后仔豬體內(nèi)活性氧（ROS）失衡是導(dǎo)致斷奶應(yīng)激產(chǎn)生的重要原因，解偶聯(lián)蛋白2（UCP2）具有調(diào)控ROS產(chǎn)生和能量代謝的功能，而有關(guān)UCP2如何調(diào)控?cái)嗄套胸i腸道ROS產(chǎn)生及與腸道發(fā)育的關(guān)系目前并不明確。本試驗(yàn)旨在探究斷奶過(guò)程中仔豬腸道 UCP2的表達(dá)規(guī)律，UCP2與ROS和腸道發(fā)育的關(guān)系，以及N-乙酰半胱氨酸（NAC）對(duì)UCP2表達(dá)的調(diào)控作用，闡明氧化應(yīng)激對(duì)腸上皮細(xì)胞UCP

2、2表達(dá)的影響，探究NAC在氧化應(yīng)激狀態(tài)下對(duì)UCP2調(diào)控的機(jī)理，為解決仔豬斷奶應(yīng)激提供新的理論支持。
　　方法：試驗(yàn)一，選擇12窩20日齡哺乳仔豬，隨機(jī)選擇6窩并從每窩選取1頭接近平均體重的仔豬處死采樣，21日齡時(shí)，12窩仔豬隨機(jī)分成2組，一組斷奶，一組不斷奶，分別于仔豬22日齡、25日齡和28日齡時(shí)每窩選取一頭仔豬處死采樣。采樣結(jié)束后分別測(cè)定血清抗氧化指標(biāo)，腸道發(fā)育指標(biāo)和小腸組織ROS含量，并采用qRT-PCR和免疫組化技術(shù)檢測(cè)U

3、CP2表達(dá)變化，分析其與腸道發(fā)育指標(biāo)和ROS含量的關(guān)系。
　　試驗(yàn)二，選擇10窩7日齡哺乳仔豬，隨機(jī)分為2組，NAC處理組和對(duì)照組，每組5窩。7日齡時(shí)仔豬開始補(bǔ)飼基礎(chǔ)日糧。NAC處理組在基礎(chǔ)飼糧中添加NAC(500 mg/kg)。在21日齡時(shí)兩組同時(shí)斷奶。25日齡時(shí)從對(duì)照組和NAC組中每窩隨機(jī)挑選一頭仔豬處死采樣，測(cè)定血清抗氧化指標(biāo)，腸道NO和H2O2含量以及UCP2在mRNA水平和蛋白水平表達(dá)變化，分析NAC對(duì)UCP2的調(diào)控作用

4、。
　　結(jié)果：試驗(yàn)一，斷奶顯著降低了仔豬的抗氧化能力，斷奶仔豬血清SOD和GSH-Px酶活力顯著降低（P<0.05），MDA含量顯著增加（P<0.05）。小腸組織中ROS的含量顯著上升（P<0.05），同時(shí)斷奶降低了仔豬小腸絨毛高度，增加了隱窩深度。通過(guò)熒光定量和免疫組化等技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)，UCP2在腸道中有分布，斷奶顯著上調(diào)了UCP2在mRNA和蛋白水平的表達(dá)。通過(guò)相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，仔豬小腸絨毛高度與UCP2蛋白表達(dá)量存在顯著負(fù)相關(guān)（P

5、<0.05），隱窩深度與UCP2蛋白表達(dá)量存在顯著正相關(guān)（P<0.05）。小腸組織NO含量和H2O2含量均與UCP2表達(dá)量存在顯著正相關(guān)關(guān)系（P<0.05）。
　　試驗(yàn)二：21日齡斷奶仔豬日糧中添加500 mg/kg的NAC后，抗氧化能力顯著上升，血清SOD和GSP-Px酶活力增加（P<0.05），H2O2和NO水平顯著下降（P<0.05），同時(shí)小腸組織中的ROS含量也顯著下降（P<0.05）。NAC能抑制UCP2的表達(dá)，研究發(fā)現(xiàn)