VEGF-C反義寡核苷酸對(duì)卵巢癌細(xì)胞株SKOV3生物學(xué)行為的影響.pdf

1、目的：探討VEGF-C反義寡核苷酸(ASODN)對(duì)卵巢癌細(xì)胞株SKOV3生物學(xué)行為的影響。 方法：采用脂質(zhì)體作為載體，將經(jīng)人工合成經(jīng)硫代磷酸修飾的VEGF-C ASODN轉(zhuǎn)染卵巢癌細(xì)胞株SKOV3，MTT法檢測(cè)VEGF-CASODN對(duì)細(xì)胞的增殖抑制作用；鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期；免疫細(xì)胞化學(xué)SP法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)VEGF-C表達(dá)變化；MTT法檢測(cè)細(xì)胞粘附能力；Transwell小室體外侵襲遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲遷移

2、能力；Western-blot檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)E-cadherin和MMP-2蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果：1．VEGF-C ASODN能明顯抑制SKOV3細(xì)胞的增殖能力(P<0.01)，并呈劑量-時(shí)間依賴關(guān)系，而LF對(duì)照組和SODN組對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)明顯抑制作用。2．VEGF-C ASODN能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，可見(jiàn)核固縮、核碎裂等典型改變。 3．流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示VEGF-C ASODN組細(xì)胞凋亡率為14.55％，與對(duì)照組和SODN組比較，S期細(xì)胞

3、百分比增高，細(xì)胞阻滯于S期。 4．免疫細(xì)胞化學(xué)S-P法顯示轉(zhuǎn)染VEGF-CASODN后，與對(duì)照組和SODN組比較，SKOV3細(xì)胞內(nèi)VEGF-C表達(dá)明顯減弱(P<0.01)。 5．粘附實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示VEGF-C ASODN轉(zhuǎn)染后，在30 min、60 min、90min、120min各時(shí)間段與對(duì)照組和SODN組相比細(xì)胞粘附率都有明顯的的下降(P<0.01)。 6．體外侵襲遷移實(shí)驗(yàn)顯示VEGF-C ASODN組穿膜細(xì)胞數(shù)目明顯減少(P<0.0