全雄黃顙魚(yú)蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)生理及y+LAT1基因表達(dá)調(diào)控的部分機(jī)制研究.pdf

1、本研究以全雄黃顙魚(yú)為試驗(yàn)動(dòng)物，通過(guò)生長(zhǎng)試驗(yàn)、消化試驗(yàn)、比較屠宰試驗(yàn)，結(jié)合生長(zhǎng)性能、消化率、酶學(xué)、基因表達(dá)量等指標(biāo)的測(cè)定，旨在探討全雄黃顙魚(yú)對(duì)飼料蛋白質(zhì)、氨基酸的消化吸收機(jī)制與利用規(guī)律，掌握全雄黃顙魚(yú)蛋白質(zhì)、賴(lài)氨酸的適宜需求量，為完善全雄黃顙魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)生理與營(yíng)養(yǎng)需求參數(shù)提供依據(jù)。主要研究?jī)?nèi)容如下:
　　1.設(shè)計(jì)3種蛋白質(zhì)水平分別為40％、37％、34％的試驗(yàn)飼料，飼喂平均體重為（10.11±0.12）g的黃顙魚(yú)，研究飼料不同蛋白質(zhì)水平

2、對(duì)全雄黃顙魚(yú)表觀消化率及消化酶活性的影響。結(jié)果表明:1）飼料不同蛋白質(zhì)水平對(duì)全雄黃顙魚(yú)能量、蛋白質(zhì)、脂肪和氨基酸的表觀消化率影響顯著(P＜0.05)，且隨飼料蛋白質(zhì)水平的降低，其呈現(xiàn)出逐漸升高的趨勢(shì);2）飼料不同蛋白質(zhì)水平對(duì)全雄黃顙魚(yú)腸淀粉酶和胃蛋白酶活性均無(wú)顯著影響(P＞0.05)，對(duì)其他組織消化酶的活性影響極顯著(P＜0.01);肝淀粉酶、胃淀粉酶和不同組織的脂肪酶及胃蛋白酶的活性均是37％組最高;而胰蛋白酶活性均隨著飼料蛋白質(zhì)水平

3、的降低而下降。結(jié)論:在一定范圍內(nèi)，適當(dāng)降低飼料蛋白質(zhì)水平，可顯著提高全雄黃顙魚(yú)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。
　　2.設(shè)計(jì)5組蛋白質(zhì)水平分別為43％、42％、40％、39％、36％的試驗(yàn)飼料，飼喂平均體重2 g左右的全雄黃顙魚(yú)60 d，探討飼料不同蛋白質(zhì)水平對(duì)其生長(zhǎng)、體組成及血清生化指標(biāo)的影響。結(jié)果表明:1）42％組增重率、特定生長(zhǎng)率、蛋白質(zhì)效率極顯著高于其它四組（P＜0.01），餌料系數(shù)極顯著低于其它四組(P＜0.01)，以蛋白質(zhì)效率為參

4、考指標(biāo)，全雄黃顙魚(yú)最適宜飼料蛋白質(zhì)水平為41.77％;2）粗蛋白、粗脂肪、粗灰分及氨基酸沉積率均隨著飼料蛋白質(zhì)水平的降低而升高，且組間差異極顯著(P＜0.01);3）飼料不同蛋白質(zhì)水平極顯著影響全雄黃顙魚(yú)血清ALT和AST（P＜0.01），但對(duì)TP、ALB、GLOB、GLU、BUN、CHO1和TG無(wú)顯著影響(P＞0.05);4)隨著飼料蛋白質(zhì)水平的降低，全雄黃顙魚(yú)全魚(yú)、肌肉及去內(nèi)臟樣粗蛋白含量變化不大(P＞0.05)，但全魚(yú)、去內(nèi)臟樣粗

5、脂肪含量呈逐漸升高的趨勢(shì)(P＜0.01)，肌肉粗脂肪含量呈逐漸降低的趨勢(shì)（P＜0.01）;粗灰分含量與粗脂肪含量變化情況相反(P＜0.01);隨著飼料蛋白質(zhì)水平的降低，全雄黃顙魚(yú)幼魚(yú)全魚(yú)氨基酸含量變化不大（P＞0.05），但肌肉(P＜0.05)、去內(nèi)臟樣(P＜0.01)總氨基酸含量、必需氨基酸總量均呈現(xiàn)出逐漸降低的趨勢(shì)。結(jié)論:全雄黃顙魚(yú)幼魚(yú)適宜飼料蛋白質(zhì)水平為41.77％。
　　3.設(shè)計(jì)4組試驗(yàn)飼料，其中對(duì)照組飼料蛋白質(zhì)水平為38

6、％，Lys組、Thr組、Met組是在對(duì)照組飼料的基礎(chǔ)上分別添加1.4％微囊賴(lài)氨酸、0.7％微囊蘇氨酸和0.37％微囊蛋氨酸，飼喂平均體重（9.29±0.11）g的黃顙魚(yú)，研究飼料中添加不同人工合成氨基酸對(duì)全雄黃顙魚(yú)生長(zhǎng)性能及消化率的影響。結(jié)果顯示:1）Lys組增重率和蛋白質(zhì)效率均顯著高于其它三組(P＜0.05)，且餌料系數(shù)顯著低于其它各組(P＜0.05)，Lys組特定生長(zhǎng)率與Met組之間差異不顯著(P＞0.05)，但顯著高于對(duì)照組和Th

7、r組(P＜0.05)，成活率各組間差異不顯著（P＞0.05）;2）Thr組和Met組干物質(zhì)消化率、粗蛋白質(zhì)消化率之間無(wú)顯著差異（P＞0.05），但均顯著高于對(duì)照組和Lys組(P＜0.05)，Met組脂肪消化率顯著高于其它三組(P＜0.05)，能量消化率Thr組顯著高于其它三組(P＜0.05);Thr組氨基酸消化率最高，對(duì)照組氨基酸消化率最低，除谷氨酸消化率各組間差異不顯著外(P＞0.05)，其余氨基酸消化率均達(dá)到極顯著水平(P＜0.01

8、)。結(jié)論:在蛋白質(zhì)水平為38％的配合飼料中添加1.4％微囊賴(lài)氨酸對(duì)全雄黃顙魚(yú)幼魚(yú)具有明顯的促生長(zhǎng)效果。
　　4.設(shè)計(jì)9組試驗(yàn)飼料，其中對(duì)照組蛋白質(zhì)水平為34％，其余各組是在對(duì)照組飼料的基礎(chǔ)上分別添加0.5％、1.5％、2.5％晶體賴(lài)氨酸和1％、2％、3％、4％、5％微囊賴(lài)氨酸，飼喂平均體重5.5 g左右的黃顙魚(yú)63 d，旨在探討全雄黃顙魚(yú)對(duì)晶體或微囊氨基酸的利用效果及對(duì)賴(lài)氨酸的適宜需求。結(jié)果表明:1）隨著飼料賴(lài)氨酸水平升高，全雄黃

9、顙魚(yú)增重率、特定生長(zhǎng)率、蛋白質(zhì)效率呈現(xiàn)出先上升后降低的趨勢(shì)(P＜0.01)，以蛋白質(zhì)效率為參考指標(biāo)，可得全雄黃顙魚(yú)適宜飼料賴(lài)氨酸水平為2.61％;蛋白質(zhì)沉積率、脂肪沉積率、灰分沉積率及氨基酸沉積率在晶體賴(lài)氨酸添加組呈現(xiàn)出逐漸升高的趨勢(shì)(P＜0.05)，而微囊賴(lài)氨酸添加組則呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)(P＜0.05);2)飼料中添加晶體或微囊賴(lài)氨酸對(duì)魚(yú)體粗蛋白質(zhì)含量影響不大，但粗脂肪含量隨飼料中賴(lài)氨酸水平的升高而增加(P＜0.05)，而粗灰分

10、含量隨飼料中賴(lài)氨酸水平的升高而減少(P＜0.05);3)隨著飼料賴(lài)氨酸水平的升高，全魚(yú)氨基酸含量無(wú)明顯變化(P＞0.05)，肌肉氨基酸含量呈現(xiàn)出降低的趨勢(shì)(P＜0.05)，去內(nèi)臟樣氨基酸含量呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)(P＜0.05)。結(jié)論:在本試驗(yàn)條件下，全雄黃顙魚(yú)幼魚(yú)適宜飼料賴(lài)氨酸水平為2.61％，且在低蛋白飼料中(34％)添加晶體或微囊賴(lài)氨酸能促進(jìn)全雄黃顙魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)。
　　5.利用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)，并利用實(shí)

11、時(shí)熒光定量PCR探討y+LAT1在黃顙魚(yú)各組織中的表達(dá)情況以及添加不同形式氨基酸對(duì)其mRNA的影響。結(jié)果表明:1）在全雄黃顙魚(yú)的9個(gè)組織中均檢測(cè)到y(tǒng)+LAT1基因的表達(dá)，其相對(duì)表達(dá)量高低順序?yàn)橛拈T(mén)＞肝臟＞腦、心、胃、前腸、中腸＞腎＞后腸，組間差異顯著(P＜0.05);2)飼料中添加微囊Lys，前腸和胃y+LAT1 mRNA表達(dá)水平均呈上升趨勢(shì)(P＜0.05)。結(jié)論:在飼料中添加微囊Lys可以上調(diào)前腸和胃y+LAT1 mRNA的表達(dá)水平。