花生四烯酸表氧化物水解酶sEH抑制劑對脊髓損傷后神經(jīng)血管單元多靶點的保護作用及其機制研究.pdf

1、本文主要從以下兩個部分展開論述：
　　第一部分 花生四烯酸表氧化物水解酶sEH抑制劑在正常脊髓組織及損傷后的表達
　　目的：探討花生四烯酸表氧化物水解酶sEH在正常及重力打擊損傷后脊髓組織中的表達。
　　方法：免疫熒光雙標染色法檢測花生四烯酸表氧化物水解酶（sEH）在正常脊髓組織星形膠質(zhì)細胞，小膠質(zhì)細胞以及神經(jīng)元中的表達。通過自由落體重力打擊法建立SD大鼠脊髓損傷的模型。免疫熒光雙標染色法及Westemblot檢測脊髓

2、損傷后花生四烯酸表氧化物水解酶（sEH）的表達變化。
　　結(jié)果：在正常脊髓組織中星形膠質(zhì)細胞以及部分神經(jīng)元廣泛表達花生四烯酸表氧化物水解酶（sEH），以星形膠質(zhì)細胞表達為主，而小膠質(zhì)細胞幾乎不表達花生四烯酸表氧化物水解酶（sEH）。脊髓損傷后其表達量在不同時間點都較正常組有所上調(diào)（P＜0.05）。
　　結(jié)論：花生四烯酸表氧化物水解酶（sEH）在正常脊髓組織中廣泛表達，且主要分布在星形膠質(zhì)細胞，部分表達于神經(jīng)元，脊髓損傷后隨著

3、損傷時間的延長其表達量升高。
　　第二部分 花生四烯酸表氧化物水解酶sEH抑制劑對脊髓損傷后神經(jīng)血管單元多靶點的保護作用及其機制研究
　　目的：探討花生四烯酸表氧化物水解酶sEH抑制劑AUDA對脊髓損傷后炎性反應(yīng)、膠質(zhì)疤痕形成、血管再生、神經(jīng)元凋亡及功能修復(fù)等的影響及作用機制。
　　方法：通過自由落體重力打擊法建立SD大鼠脊髓損傷的模型。免疫熒光及Western blot檢測花生四烯酸表氧化物水解酶抑制劑AUDA對脊髓

4、損傷后sEH的表達變化的影響，以及AUDA對脊髓損傷后炎性因子表達、膠質(zhì)細胞活化、血管再生的影響。尼氏染色及TUNEL染色檢測神經(jīng)元凋亡的情況，免疫熒光及BBB評分評估神經(jīng)功能的損傷與恢復(fù)。
　　結(jié)果：AUDA干預(yù)顯著減少脊髓損傷周邊區(qū)sHE的表達（P＜0.05）。脊髓損傷后3d、7d，AUDA干預(yù)減輕小膠質(zhì)細胞的活化、炎性因子IL-1β的表達，以及中性粒細胞MPO,細胞毒性T淋巴細胞CD8的浸潤（P＜0.05）。損傷后14d，A