可溶性環(huán)氧化物水解酶抑制劑在低灌注白質(zhì)損傷與功能重建中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：本文以可溶性環(huán)氧化物水解酶（soluble epoxide hydrolase, sEH）抑制劑TPPU為調(diào)控靶點(diǎn)，研究sEH在慢性低灌注性腦白質(zhì)損傷后的表達(dá)變化。探究其調(diào)控對(duì)低灌注損傷后白質(zhì)神經(jīng)血管單元的保護(hù)作用及相關(guān)機(jī)制。
　　方法：利用C57BL/6J小鼠，建立雙側(cè)頸總動(dòng)脈狹窄（bilateral common carotid artery stenosis，BCAS）模型。聯(lián)合激光散斑襯比成像系統(tǒng)及激光多普勒監(jiān)測(cè)BC

2、AS術(shù)中小鼠血流變化。采用LFB染色，免疫熒光染色和western blot方法觀察sEH在正常小鼠腦白質(zhì)內(nèi)的表達(dá)及其在低灌注白質(zhì)損傷后的動(dòng)態(tài)變化，檢測(cè)白質(zhì)損傷程度、各種類型膠質(zhì)細(xì)胞及相關(guān)炎性因子動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)。BrdU染色觀察少突膠質(zhì)細(xì)胞的增殖及分化。透射電鏡觀察大腦深部白質(zhì)髓鞘形態(tài)及厚度變化，八臂迷宮行為學(xué)檢測(cè)造模后小鼠認(rèn)知功能等神經(jīng)功能的變化情況。通過(guò)每日腹腔注射sEH抑制劑TPPU，觀察其對(duì)低灌注性腦白質(zhì)損傷的多靶點(diǎn)保護(hù)作用及相關(guān)

3、機(jī)制。
　　結(jié)果：激光多普勒、激光散斑襯比成像系統(tǒng)、免疫熒光染色、LFB染色、western blot、透射電鏡及行為學(xué)檢測(cè)等多種方法驗(yàn)證小鼠 BCAS造模成功，存在低灌注性腦白質(zhì)損傷。低灌注性腦白質(zhì)損傷后sEH的總蛋白水平明顯增加，伴隨髓鞘連接完整性破壞，少突膠質(zhì)細(xì)胞減少及小膠質(zhì)細(xì)胞活化。外源性給予sEH抑制劑TPPU可顯著抑制小膠質(zhì)細(xì)胞活化及相關(guān)炎性反應(yīng)，促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2型轉(zhuǎn)化，促進(jìn)少突膠質(zhì)細(xì)胞的存活，維持髓鞘軸突連接完整