葉下珠復方Ⅱ號抑制DEN誘導大鼠肝癌形成及作用機制研究.pdf

1、目的:
　　觀察具有清熱活血健脾補腎作用的葉下珠復方Ⅱ號對二乙基亞硝胺(DEN)誘導大鼠肝癌形成的抑制作用及其對IL-6信號通路及MicroRNAlet-7a網(wǎng)絡調(diào)控作用，進一步探討其抗肝癌的作用機制。
　　方法:
　　將240只SPF級Wistar雄性大鼠采用隨機分組的方法分為5組，分別為正常對照組、DEN模型組、葉下珠復方Ⅱ號高劑量組、葉下珠復方Ⅱ號低劑量組和陽性藥對照組。選用二乙基亞硝胺(DEN)作為誘導劑誘導的

2、大鼠肝癌模型，造模18周，同時給予藥物干預，每6周取各組大鼠8只，觀察大鼠一般情況及肝功能改變和肝結(jié)節(jié)形成等指標，肝組織病理切片及HE染色，腫瘤組織采用Edmondson分級，大鼠血清IL-6選用放免法進行檢測;選用實時熒光定量PCR法、Western blot法分別檢測肝組織IL-6信號通路及MicroRNA調(diào)控網(wǎng)絡基因的mRNA和蛋白質(zhì)表達的改變。
　　結(jié)果:
　　實驗第18周末，葉下珠復方Ⅱ號高、低劑量組大鼠肝癌結(jié)節(jié)數(shù)

3、較模型組顯著減少，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。葉下珠復方Ⅱ號高、低劑量組大鼠血清IL-6、ALT、AST水平與模型組比較均明顯降低（P＜0.05）。實驗第18周末，與模型組比較，葉下珠復方Ⅱ號高劑量組MicroRNA let-7a表達量顯著上升，NF-κ B/P65、IL-6、lin28、stat3、ras和c-myc基因mRNA表達量均顯著降低，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);葉下珠復方Ⅱ號高、低劑量組miR-21、miR

4、-181b-5p表達量均顯著下降，與模型組比較差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。實驗第18周末，葉下珠復方Ⅱ號高、低劑量組STAT3、p-STAT3和CYLD蛋白表達均顯著低于模型組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　具有清熱活血健脾補腎作用的葉下珠復方Ⅱ號通過上調(diào)let-7a的表達和下調(diào)NF-κ B/P65表達，從而抑制IL-6的表達，阻斷IL-6信號通路的活化，進而抑制DEN誘導肝癌的發(fā)生和發(fā)展，起