水溶性紫杉醇凍干粉臨床前藥物初步評價.pdf

1、紫杉醇已于1992年被美國FDA批準作為抗卵巢癌新藥上市，紫杉醇對卵巢癌、乳腺癌、肺癌等多種腫瘤有良好的治療效果。但是由于其難溶于水，需要溶于聚氧乙烯蓖麻油(cremophor EL)與無水乙醇混合溶媒中增加其水溶性，而聚氧乙烯蓖麻油在體內(nèi)降解時釋放組胺，會引起不同程度的過敏反應(yīng)，嚴重者可引起神經(jīng)細胞內(nèi)顆粒釋放及骨髓鞘改變等不良效果。為降低藥物毒性，提高其療效，近年來各國都在陸續(xù)開發(fā)紫杉醇的新劑型，本實驗室利用紫杉醇、人血白蛋白及甘露醇

2、，通過乳化法制備出水溶性紫杉醇凍干粉，水溶性紫杉醇凍干粉屬于紫杉醇微粉類藥物，其具有水溶性較好、毒性較低等特點。為了驗證水溶性紫杉醇凍干粉的抗腫瘤效果，我們通過以下途徑進行了研究:
　　1)用紫杉醇敏感人體腫瘤細胞對水溶性紫杉醇凍干粉進行體外活性檢測;
　　2）對S180荷瘤小鼠模型及SKOV-3裸鼠模型進行腹腔注射研究水溶性紫杉醇凍于粉體內(nèi)抑瘤活性;
　　3)通過尾靜脈注射水溶性紫杉醇凍干粉進行急性毒性試驗，觀察給藥

3、后個體行為狀態(tài);
　　4）利用Caco-2細胞模型模擬體內(nèi)吸收，檢驗水溶性紫杉醇凍干粉能否作為一種口服劑型被開發(fā)。
　　1.以紫杉醇原料藥為陽性對照，通過MTT比色法研究水溶性紫杉醇凍干粉對紫杉醇敏感腫瘤細胞的抗腫瘤效果，實驗結(jié)果表明:水溶性紫杉醇凍干粉對人乳腺癌細胞(MCF-7)、人卵巢癌細胞(SKOV-3)、人前列腺癌細胞(PC-3)均有較好的抑制作用，IC50值分別為0.886μM、0.913μM、0.687μM。

4、r>　　2.建立鼠肉瘤S180系小鼠移植瘤模型，隨機分為6組，通過腹腔注射法給藥，分別注射生理鹽水、已上市的紫杉醇注射液、ABI-007注射液及3種濃度（高劑量，中劑量，低劑量）的水溶性紫杉醇溶液，經(jīng)過注射7d后，斷頸處死小鼠，解剖稱量瘤重。實驗結(jié)果表明:水溶性紫杉醇低劑量組抑瘤率為52.8％，水溶性紫杉醇中劑量組抑瘤率為54.9％，水溶性紫杉醇高劑量組抑瘤率為81.3％，ABI-007對照組的抑瘤率為71.9％，陽性紫杉醇對照組的抑瘤

5、率81.6％。實驗數(shù)據(jù)表明水溶性紫杉醇凍干粉對小鼠移植性腫瘤S-180的生長有明顯的抑瘤作用。
　　3.建立人卵巢癌（SKOV-3）荷瘤裸鼠移植瘤模型，將成長健康的裸鼠隨機分為5組，分別為生理鹽水組、紫杉醇對照組、ABI-007組、水溶性紫杉醇凍干粉中劑量組、水溶性紫杉醇凍干粉高劑量組，按劑量腹腔注射給藥4周。在給藥期間對SKOV-3荷瘤裸鼠的體重與瘤體積進行測量，計算瘤重。水溶性紫杉醇中劑量組抑瘤率為54.9％，水溶性紫杉醇高劑

6、量組抑瘤率為65.1％，陽性紫杉醇對照組抑瘤率57.7％，ABI-007對照組的抑瘤率58.1％。實驗結(jié)果表明:水溶性紫杉醇凍干粉對裸鼠人卵巢癌SKOV-3移植瘤的抑制作用較明顯。
　　4.為了研究水溶性紫杉醇凍干粉對小鼠的急性毒性反應(yīng)本文采用了最大給藥量法，在合理的最大給藥濃度的前提下，以允許的最大劑量20 mg/kg單次尾靜脈注射給藥，同時觀察給藥后昆明小鼠各組的生長狀況，實驗結(jié)果證明:在給藥劑量范圍內(nèi)水溶性紫杉醇凍干粉注射劑

7、的毒性很小，安全系數(shù)高。
　　5.為了檢驗水溶性紫杉醇凍干粉能否開發(fā)成一種新的口服劑型，本文利用Caco-2細胞模型，對6個濃度（0.5μM、1μM、2μM、5μM、10μM、20μM）下的水溶性紫杉醇凍干粉轉(zhuǎn)運量進行了研究，分別考察了從AP側(cè)（頂側(cè)）→BL側(cè)（基底側(cè)）和BL側(cè)→AP側(cè)的跨膜轉(zhuǎn)運特性，水溶性紫杉醇凍干粉的Papp AP→ BL值為20.9±2.1×10-6 cm/s;N=3。吸收效果好的藥物表觀滲透系數(shù)Papp值大