應(yīng)用干細(xì)胞及生物支架技術(shù)治療糖尿病初探.pdf

1、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)替代療法是1型糖尿病治療領(lǐng)域熱點(diǎn)之一，目前仍未有報(bào)道將iPSC在三維環(huán)境中向胰島方向誘導(dǎo)。本研究采用三維支架一細(xì)胞外基質(zhì)培養(yǎng)體系，將iPSC誘導(dǎo)成為胰島樣組織，并探索誘導(dǎo)后細(xì)胞動(dòng)物體內(nèi)移植方案，以期在糖尿病治療及組織工程領(lǐng)域開(kāi)辟新的道路。
　　 第一部分將iPSC-1011系細(xì)胞注射入免疫缺陷小鼠皮下，移植后45天內(nèi)原位腫瘤逐漸形成，行腫瘤切除及病理檢查可見(jiàn)腫瘤包含三個(gè)胚層細(xì)胞。這個(gè)結(jié)果證明了iPSC-

2、1011系細(xì)胞具有多能性。
　　 第二部分將iPSC在二維平面及三維立體環(huán)境中誘導(dǎo)分化，隨后進(jìn)行體外功能測(cè)定。倒置顯微鏡觀察到誘導(dǎo)30天后iPSC來(lái)源細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大量小泡，雙硫腙染色呈陽(yáng)性；RT-PCR證明誘導(dǎo)后的細(xì)胞表達(dá)胰島細(xì)胞相關(guān)基因；免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)部分細(xì)胞呈胰島素陽(yáng)性、胰高血糖素陽(yáng)性和生長(zhǎng)抑素陽(yáng)性；經(jīng)不同濃度糖刺激時(shí)，二維及三維培養(yǎng)組的胰島素分泌量均有顯著性差異（P＜0.01），高糖刺激后胰島素分泌顯著性增加，且高糖刺