蒸發(fā)光散射檢測(cè)器在復(fù)雜中藥檢測(cè)中的應(yīng)用及與毛細(xì)管分離系統(tǒng)聯(lián)用的研究.pdf

1、隨著中藥現(xiàn)代化研究的不斷深入,對(duì)分離分析技術(shù)的要求逐步升級(jí),對(duì)分析檢測(cè)方法的多樣性與先進(jìn)性也提出了巨大挑戰(zhàn)。單種中藥所含化學(xué)成分可能有百余種,并且隨著研究的發(fā)展還可能不斷有新的化學(xué)成分被發(fā)現(xiàn)。對(duì)于中藥復(fù)方,在炮制煎煮過(guò)程中還可能產(chǎn)生出新的成分,因此中藥的質(zhì)量控制是非常復(fù)雜的問(wèn)題。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(Evaporative light scattering detector, ELSD)作為一款通用的檢測(cè)器,可檢測(cè)揮發(fā)性低于流動(dòng)相的任何樣品

2、,具有廣泛的梯度和溶劑兼容性,尤其在植物藥質(zhì)量控制、食品安全等領(lǐng)域更具優(yōu)勢(shì)。目前,世界上植物藥,或者稱(chēng)為更廣泛意義上的天然藥物的復(fù)興方興未艾,是全球“綠色”浪潮的組成部分。銀杏葉片藥物在國(guó)際上廣泛使用,它是現(xiàn)代植物藥的典型代表,也是第一個(gè)現(xiàn)代植物藥,標(biāo)志著現(xiàn)代植物藥的開(kāi)始。鑒于紫外(UV)檢測(cè)手段也屬高度靈敏的檢測(cè)手段之一,本研究的一部分即將紫外的靈敏與蒸發(fā)光散射檢測(cè)的通用互補(bǔ)結(jié)合,搭建了新型的雙檢測(cè)器平臺(tái),對(duì)復(fù)雜中藥系統(tǒng)銀杏葉提取物及

3、其中重要組分萜類(lèi)內(nèi)酯進(jìn)行分離分析鑒定,并在此基礎(chǔ)上發(fā)展了雙重指紋圖譜的解析方法。另一方面,儀器微型化已成為當(dāng)前分析儀器及方法的一個(gè)重要發(fā)展方向,在生物醫(yī)學(xué)、高通量藥物合成篩選等方面有著廣闊的前景。本研究初步考察了微型化噴霧方式。將微流蒸發(fā)光散射檢測(cè)器與毛細(xì)管分離系統(tǒng)聯(lián)用,進(jìn)行復(fù)雜中藥系統(tǒng)銀杏葉提取物及其分散片制劑、其中萜類(lèi)內(nèi)酯與黃酮類(lèi)物質(zhì)的分離檢測(cè)。這種方法擴(kuò)大了毛細(xì)管液相色譜(cLC)、加壓毛細(xì)管電色譜(pCEC)的應(yīng)用范圍,使微流蒸

4、發(fā)光散射檢測(cè)器與毛細(xì)管分離系統(tǒng)的聯(lián)用成為解決復(fù)雜樣品分離分析強(qiáng)有力的工具。本研究分為五個(gè)部分：
　　第一章綜述了蒸發(fā)光散射檢測(cè)器的基本原理、檢測(cè)步驟及應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。同時(shí)介紹了復(fù)雜中藥系統(tǒng)銀杏葉提取物、中藥指紋圖譜質(zhì)量控制的相關(guān)背景。此外總結(jié)了毛細(xì)管分離系統(tǒng)及相關(guān)檢測(cè)器聯(lián)用研究,并詳述了與蒸發(fā)光散射檢測(cè)器相近檢測(cè)原理的另一種光散射檢測(cè)器-冷凝光散射檢測(cè)器與毛細(xì)管分離體系聯(lián)用的研究進(jìn)展。
　　第二章搭建了HPLC-UV-ELSD雙重

5、檢測(cè)器平臺(tái),將紫外的靈敏與蒸發(fā)光散射檢測(cè)的通用互補(bǔ)結(jié)合,對(duì)復(fù)雜中藥系統(tǒng)銀杏葉提取物及其中重要組分萜類(lèi)內(nèi)酯(銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C及白果內(nèi)酯)進(jìn)行分離分析鑒定。優(yōu)化溶劑提取條件為70/30(v/v)甲醇/水,體系超聲60 min;優(yōu)化色譜條件為:溶劑A(0.05％aqueous TFA)與溶劑B(異丙醇),梯度條件:5-20%溶劑B,0-50 min,保持20%B至80 min。
　　第三章研究嘗試了一種有效、成功的雙重

6、指紋圖譜分析方法。首先有效分離全國(guó)十產(chǎn)地(陜西、北京、山東、浙江、廣東、江蘇、天津、湖南)銀杏葉提取物。其次采用中藥色譜指紋分析相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)對(duì)次十個(gè)產(chǎn)地來(lái)源的藥材進(jìn)行相似度分析,分別建立UV與ELSD檢測(cè)器各自的對(duì)照指紋圖譜。采用SPSS軟件進(jìn)行主成分分析與聚類(lèi)分析,采用可視化與直觀的3D曲線(xiàn)圖表征各產(chǎn)地藥材區(qū)別信息。最后合并單個(gè)檢測(cè)指紋圖譜進(jìn)行分析,為復(fù)雜中藥銀杏葉提取物的質(zhì)量控制提供了一種更全面的信息獲取方式。
　　第四章分

7、別初步考察了微型化噴霧方式中的電噴霧與氣動(dòng)噴霧方式。搭建離線(xiàn)電噴霧平臺(tái),通過(guò)考察不同噴霧管材質(zhì)、10種噴針位置、6種噴針內(nèi)徑、5種電極模式,對(duì)離線(xiàn)噴霧距離進(jìn)行表征,為電噴霧方式在微型化ELSD微型化中的應(yīng)用做了鋪墊。此外采用最新研制的微流蒸發(fā)光散射檢測(cè)器,通過(guò)縮小不銹鋼套管與毛細(xì)管?chē)娽樀拈g隙由40μm至25μm,有效減小載氣流量至1 L/min以下,且樣品響應(yīng)信噪比得到提高。通過(guò)提高漂移管溫度與載氣流量,增大有機(jī)相比例,可提高信噪比,減