納米金膠-殼聚糖電化學(xué)DNA生物傳感器的構(gòu)建及檢測(cè)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、電化學(xué)DNA生物傳感器是近幾年迅速發(fā)展起來(lái)的一種全新的基因檢測(cè)技術(shù)，具有DNA雜交反應(yīng)高度的特異性，又具有電化學(xué)傳感器靈敏度高、響應(yīng)快、操作簡(jiǎn)便、微型化、價(jià)格低廉等顯著優(yōu)點(diǎn)，成為近年國(guó)內(nèi)外研究熱點(diǎn)。納米材料由于其小尺寸效應(yīng)、量子效應(yīng)、表面、界面效應(yīng)和宏觀量子隧道效應(yīng)而表現(xiàn)出奇異的光、電、磁等獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì)，引起了全球科學(xué)家的廣泛關(guān)注。將納米材料引入到生物傳感器，研制納米生物傳感器，可顯著提高生物傳感器的靈敏度、重現(xiàn)性和選擇性等，納米

2、生物傳感器正成為新一代的DNA檢測(cè)方法，具有巨大的潛在應(yīng)用價(jià)值。 本論文以具有良好生物相容性和生物可降解性的殼聚糖為分散劑和穩(wěn)定劑，以氯金酸為原料，硼氫化鈉為還原劑，制備了具有良好性能的金膠/殼聚糖復(fù)合納米材料。利用透射電鏡(TEM)、紫外分光光度法、電化學(xué)方法對(duì)制得的金膠/殼聚糖復(fù)合納米材料進(jìn)行表征。結(jié)果表明，制得的具有核殼結(jié)構(gòu)的金膠/殼聚糖復(fù)合納米材料在溶液中分散均勻、穩(wěn)定性好。并用金膠/殼聚糖復(fù)合納米材料修飾到玻碳電極表面

3、，研制基于金膠/殼聚糖復(fù)合納米材料的電化學(xué)DNA生物傳感器，分別用于慢粒白血病BCR/ABL融合基因和急早幼粒白血病PML/RARa融合基因的檢測(cè)，同時(shí)考察了傳感器的特異性、穩(wěn)定性等性能。 基于Au/CS復(fù)合納米材料的電化學(xué)DNA生物傳感器對(duì)慢粒白血病和急早幼粒白血病特異性基因序列的檢測(cè)結(jié)果表明：在Tris-HCl(pH7.40)底液中，以亞甲基藍(lán)(Methelyne Blue MB)為雜交指示劑，在優(yōu)化雜交條件下，慢粒白血病B

4、CR/ABL融合基因和急早幼粒PML-RARa融合基因序列分別在1.0×10-8～8.0×10-7mol/L和1.0×10-8～1.0×10-6mol/L的濃度范圍內(nèi)與檢測(cè)響應(yīng)信號(hào)呈良好的線性關(guān)系，檢測(cè)限為5.0×10-10mol/L。我們還選擇天然黃酮活性分子異鼠李素作為雜交指示劑，考察基于Au/CS復(fù)合納米材料的電化學(xué)DNA生物傳感器的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性等性能，分別建立慢粒白血病與急早幼粒白血病的特異基因檢測(cè)的新方法，為最終應(yīng)用于臨床早