涼茶的清咽潤(rùn)喉功效研究.pdf

1、生產(chǎn)涼茶的原料主要選于藥膳同源的中草藥，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)及藥理研究表明，涼茶中所用的藥物大多具有抗菌、消炎、解熱、抗病毒、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能等作用。本研究根據(jù)涼茶的傳統(tǒng)配方組合特點(diǎn)，結(jié)合中醫(yī)藥理論，選用了金銀花、金銀花葉、菊花、甘草、魚(yú)腥草、羅漢果、胖大海、蒲公英、桔梗、淡竹葉共10種中草藥原料，對(duì)涼茶的清咽潤(rùn)喉功效進(jìn)行了研究。 本試驗(yàn)是以國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)所批準(zhǔn)的具有清咽潤(rùn)喉功效的上述常用10種中草藥為原料，用80％的乙

2、醇進(jìn)行提取，得到粗提物。通過(guò)體外抑菌試驗(yàn)測(cè)試了10種中草藥對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌兩種供試菌的抑制作用，初步篩選出抑菌效果較好的6種中草藥。采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法優(yōu)化了抑菌物質(zhì)的提取條件，并進(jìn)一步篩選出抑菌效果較好的4種中草藥。對(duì)4種中草藥提取液的主要生物活性成分含量進(jìn)行測(cè)定，分析了抑菌作用與生物活性成分的關(guān)系。根據(jù)4種提取液對(duì)兩種供試菌的最低抑菌濃度(minimun inhibitory concentration，MIC)的測(cè)定結(jié)果，

3、依濃度由高到低進(jìn)行1：1：1：1復(fù)配，得出4種提取液最佳濃度組合配方。通過(guò)清咽潤(rùn)喉保健食品功能評(píng)價(jià)方法，雄性SD大鼠為試驗(yàn)對(duì)象，研究了復(fù)方中草藥液對(duì)致炎劑所致大鼠足跖腫脹的抑制作用。主要研究結(jié)果如下： 1.具有抑菌效果的中草藥的篩選 采用醇熱連續(xù)回流法提取，通過(guò)體外抑菌試驗(yàn)比較了10種中草藥提取液的抑菌圈直徑和最低抑菌濃度(MIC)：篩選出了抑菌活性較強(qiáng)的6種中草藥，從初步篩選結(jié)果看，單味中藥提取液對(duì)大腸桿菌的MIC介于

4、12.5～93.0rag生藥/ml之間，對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC介于6.25～93.0mg生藥/ml之間。 2.單味中草藥抑菌物質(zhì)提取條件 以初步篩選出的6種中草藥為研究對(duì)象，采用正交試驗(yàn)優(yōu)化了乙醇連續(xù)回流提取條件，選用正交表L9(34)，考察溶劑不同濃度、提取溫度、提取時(shí)間和溶劑加倍量對(duì)抑菌效果的影響。結(jié)果表明，各因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響順序?yàn)橐掖紳舛?提取時(shí)間>溶劑加倍量>提取溫度，根據(jù)方差分析得出最佳提取條件為：用70

5、％乙醇提取，料液比為1：10，溫度85℃，浸提4.5h。在此提取條件下，單昧中藥提取液對(duì)大腸桿菌的MIC介于1.6～50mg生藥/ml之間，對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC介于3.125～25mg生約/ml之間。其中金銀花葉提取液對(duì)大腸桿菌的抑菌濃度最低，其MIC為1.6mg生藥/ml，甘草提取液對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌濃度最低，其MIC為3.125g生藥/ml。 3.復(fù)配組合抑菌試驗(yàn)研究 通過(guò)最佳提取條件，對(duì)初篩出的抑菌效果較好

6、的6種中草藥進(jìn)行提取，并測(cè)定MIC值，進(jìn)一步優(yōu)選出了4種抑菌效果較好的中草藥，即金銀花、金銀花葉、甘草、羅漢果，其中金銀花、金銀花葉和甘草三種中草藥對(duì)大腸桿菌的抑制效果較佳；金銀花、甘草和羅漢果三種中草藥對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制效果較佳。分別進(jìn)行復(fù)配，通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)得出結(jié)果：與單味中草藥抑菌效果相比，配伍后單味中草藥抑菌力有顯著增效作用，配伍的中草藥間有協(xié)同作用；對(duì)大腸桿菌的MIC分別為：金銀花3.125mg生藥/ml、金銀花葉

7、1.6mg生藥/ml、甘草6.3mg生藥/ml，對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC分別為：金銀花葉3.125mg生藥/ml、甘草1.6mg生藥/ml、羅漢果12.5mg生藥/ml，根據(jù)MIC值確定了4種提取液的最佳濃度組合：金銀花3.125 mg生藥/ml、甘草6.3 mg生藥/ml、金銀花葉3.125 mg生藥/ml、羅漢果12.5 mg生藥/ml。 4.四種中草藥的主要生物活性成分分析 對(duì)體外抑菌試驗(yàn)篩選出的金銀花、金銀花葉、

8、甘草、羅漢果4種中草藥提取液中的主要生物活性物質(zhì)：綠原酸、甘草酸、羅漢果皂甙V進(jìn)行了研究。采用紫外可見(jiàn)分光光度法分別確定了最大吸收波長(zhǎng)綠原酸為330nm、甘草酸為250nm、羅漢果皂甙V為199nm。結(jié)果表明：用紫外可見(jiàn)分光光度法測(cè)定三種中草藥主要活性成分含量，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差較小，說(shuō)明測(cè)定結(jié)果重現(xiàn)性好，精密度較高，所得數(shù)據(jù)精確。金銀花、金銀花葉提取液中綠原酸的含量分別為1.15mg/ml、2.48 mg/ml；甘草酸提取液中甘草酸含量為2

9、9.68mg/ml；羅漢果提取液中羅漢果皂甙V含量為26.54mg/ml。研究表明，單味中草藥提取液的抑菌活性與其主要活性成分的含量成正比。 5.動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果表明：(1)由4種中草藥提取液配制成復(fù)方提取液大、中、小劑量組均能夠明顯抑制角叉菜膠所致的大鼠足跖腫脹度。在給藥后1h即能達(dá)到明顯的抑制效果，藥效可持續(xù)到8h以上，與空白組對(duì)照，復(fù)方提取液大、中、小三個(gè)劑量組在各個(gè)時(shí)段均有極顯著的抑制效果(P<0.01)。(2)復(fù)方提取液大