載脂蛋白M及E-選擇素基因多態(tài)性與中國(guó)漢族人群缺血性卒中的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的：腦血管病(cerebrovascular disease,CVD)是目前世界范圍內(nèi)第二位常見(jiàn)的致死原因,也是發(fā)達(dá)國(guó)家長(zhǎng)期致殘的主要原因,嚴(yán)重危害著人類的健康和生存質(zhì)量。其中缺血性中風(fēng)(Ischemic stroke,IS)約占全部CAD的70％。除了傳統(tǒng)的危險(xiǎn)因素如高血壓、糖尿病、血脂異常、吸煙、飲酒、肥胖等與腦卒中的發(fā)生有關(guān)外,許多學(xué)者已經(jīng)從不同的角度證實(shí)了IS是一種由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的復(fù)雜性疾病,并且遺傳因素在其發(fā)病

2、機(jī)制中起著尤為重要的作用。因此篩選出對(duì)IS具有遺傳易感性的個(gè)體,并進(jìn)行個(gè)體化的預(yù)防和治療,有望降低IS的發(fā)病率、致死率和致殘率,從而提高人類的健康水平。而篩選易感基因的主要方法是對(duì)候選基因的關(guān)聯(lián)研究。
　　 動(dòng)脈粥樣硬化的形成是IS的重要病理基礎(chǔ)。目前的研究已經(jīng)證實(shí),動(dòng)脈粥樣硬化是多因素影響下的復(fù)雜病理過(guò)程,其中脂代謝紊亂及炎癥反應(yīng)均與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。因此,本研究著眼于中國(guó)北方漢族人群,選擇了載脂蛋白M(Apo

3、M)和E-選擇素(E-selectin)基因作為候選基因,采用病例-對(duì)照研究的方法,比較ApoM基因的多態(tài)性位點(diǎn)rs805297、rs805296、m9404941及E-selectin基因的多態(tài)性位點(diǎn)rs5355、rs5361、rs1805193的基因型、等位基因型在病例組和對(duì)照組中的頻率分布差異,進(jìn)而探討這兩種基因多態(tài)性與中國(guó)北方漢族人群IS之間的關(guān)聯(lián),以期為探尋該病的易患基因提供一定的分子遺傳學(xué)方面的證據(jù)。
　　 方法：采

4、用病例-對(duì)照研究,病例組按病因不同分為大動(dòng)脈粥樣硬化型IS組和腔隙性腦梗死組。大動(dòng)脈粥樣硬化型IS組選取中國(guó)北方漢族人群中的大動(dòng)脈粥樣硬化型IS患者314例,其中男181例,女133例,年齡在49—82歲之間,平均年齡64.43±8.48歲,彼此無(wú)親緣關(guān)系。腔隙性腦梗死組選取中國(guó)北方漢族腔隙性腦梗死患者131例,其中男69例,女62例,年齡在50—78歲之間,平均年齡64.65±8.05歲,彼此無(wú)親緣關(guān)系。選擇性別、年齡與病例組相匹配的

5、健康個(gè)體389例作為對(duì)照組,其中男215例,女174例,年齡在50—79歲之間,平均年齡63.93±6.86歲,彼此無(wú)親緣關(guān)系。應(yīng)用多重單堿基延伸SNP分型技術(shù)(Multipies SNaPshot)進(jìn)行病例組和對(duì)照組中目的基因多態(tài)性的檢測(cè)。應(yīng)用擬合優(yōu)度x2檢驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證每個(gè)SNP位點(diǎn)基因型在抽樣群體中的分布是否符合Hardy-Weinberg平衡。對(duì)于連續(xù)性變量,以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用單因素方差分析進(jìn)行檢驗(yàn)。對(duì)于單個(gè)SNP位點(diǎn)的數(shù)據(jù),通

6、過(guò)SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件,以x2 Fisher's精確概率檢驗(yàn)其基因型、等位基因型在病例組與對(duì)照組中的頻率分布差異。然后再結(jié)合臨床資料,對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行Logistic回歸分析,以排除傳統(tǒng)混雜因素的干擾,P＜0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。ApoM與E-selectin基因?qū)S的影響以比值比(Odds Ratio,OR)和95％可信區(qū)間(95％Confidence Interval,95％CI)來(lái)評(píng)估。應(yīng)用SHEsis在線單倍型分析軟件計(jì)算

7、ApoM與E-selectin基因病例組和對(duì)照組單體型的頻率分布差異,P＜0.05表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)果：
　　 1、病例組和對(duì)照組中ApoM與E-selectin基因的每個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)基因型H-W平衡檢驗(yàn)結(jié)果顯示它們的基因型頻率分布未偏離Hardy-Weinberg平衡(p＞0.05)。這表明本課題所選取的研究人群基因遺傳平衡,數(shù)據(jù)來(lái)自同一孟德?tīng)柸后w,適合做遺傳學(xué)分析。
　　 2、大動(dòng)脈粥樣硬化型腦梗死

8、組ApoM基因rs805296位點(diǎn)的TC基因型及C等位基因型頻率分布明顯高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001,OR=1.85,95％CI:1.29-2.65:P＜0.001,OR:1.78,95％CI:1.29-2.45)。應(yīng)用條件logistic回歸校正傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素后,rs805296位點(diǎn)TC基因型頻率分布大血管組仍高于對(duì)照組,差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.023,OR=1.714,95％CI:1.076-2.732)。

9、　　 3、大動(dòng)脈粥樣硬化型腦梗死組ApoM基因rs805297位點(diǎn)基因型頻率分布與對(duì)照組未見(jiàn)有顯著差異。但其A等位基因型頻率顯著高于對(duì)照組(P=0.002,OR=1.38,95％CI:1.10-1.72)。
　　 4、大動(dòng)脈粥樣硬化型腦梗死組ApoM基因rs9404941位點(diǎn)的基因型、等位基因型頻率分布與對(duì)照組間未見(jiàn)有顯著性差異。
　　 5、在大動(dòng)脈粥樣硬化型腦梗死組和對(duì)照組中,ApoM基因rs805296、rs805

10、297及rs9404941組建的單體型頻率分布在病例組和對(duì)照組中無(wú)顯著性差異。
　　 6、大動(dòng)脈粥樣硬化型腦梗死組與對(duì)照組ApoM基因rs805296位點(diǎn)多態(tài)性與血脂的相關(guān)性分析結(jié)果顯示:在病例組,ApoM基因rs805296位點(diǎn)各基因型攜帶者的血甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇的水平均無(wú)明顯差異。在對(duì)照組中,攜帶CC基因型的個(gè)體較攜帶RR及TC基因型的個(gè)體血總膽固醇水平更高(P=0.019),其余指標(biāo)

11、未見(jiàn)明顯差異。在病例組與對(duì)照組兩組個(gè)體間,各基因型攜帶者的各項(xiàng)血脂指標(biāo)均未見(jiàn)明顯差異。
　　 7、在腔隙性腦梗死組ApoM基因rs9404941、rs805296及rs805297各位點(diǎn)基因型及等位基因型頻率分布和對(duì)照組未見(jiàn)有顯著差異。
　　 8、大動(dòng)脈粥樣硬化型腦梗死組E-selectin基因rs1805193及rs5355各位點(diǎn)基因型及等位基因型頻率分布和對(duì)照組未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 9、大動(dòng)脈粥樣硬化型

12、腦梗死組E-selectin基因rs5361位點(diǎn)的AC基因型及C等位基因型頻率分布明顯高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001,OR=2.76,95％CI:1.54-4.96；P＜0.001,OR=2.80,95％CI:1.58-4.94)。應(yīng)用條件logistic回歸分析校正后,rs5361AC基因型頻率分布病例組仍高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.010,OR=2.665,95％CI:1.265-5.613)。
　　

13、 10、由E-selectin基因rs5355、rs5361構(gòu)建的單體型頻率分布:CC單體型在大動(dòng)脈粥樣硬化型腦梗死組中的頻率分布高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001,OR=2.92,95％CI:1.64-5.22)。
　　 11、E-selectin基因rs5355、rs5361及rs1805193各位點(diǎn)基因型及等位基因型頻率分布在腔隙性腦梗死組和對(duì)照組中未見(jiàn)有顯著差異。
　　 結(jié)論：
　　 1、Apo

14、M基因rs805296位點(diǎn)的TC基因型及C等位基因型可能與中國(guó)北方漢族人群大動(dòng)脈粥樣硬化型IS具有相關(guān)性。
　　 2、ApoM基因rs805297位點(diǎn)的A等位基因型可能是中國(guó)北方漢族人群大動(dòng)脈粥樣硬化型IS的獨(dú)立的危險(xiǎn)因素。
　　 3、ApoM基因rs9404941位點(diǎn)的基因多態(tài)性可能與中國(guó)北方漢族人群大動(dòng)脈粥樣硬化型IS之間無(wú)顯著的相關(guān)性。
　　 4、未發(fā)現(xiàn)由ApoM基因rs9404941、rs805297、r

15、s805296位點(diǎn)構(gòu)建的危險(xiǎn)性或保護(hù)性單體型。
　　 5、ApoM基因rs805296、rs805297、rs9404941位點(diǎn)的基因多態(tài)性可能與中國(guó)北方漢族人群腔隙性腦梗死之間無(wú)相關(guān)性。
　　 6、E-selectin基因rs5361位點(diǎn)的AC基因型及C等位基因型可能與中國(guó)北方漢族人群大動(dòng)脈粥樣硬化型IS具有相關(guān)性。
　　 7、E-selectin基因rs5355、rs1805193位點(diǎn)的多態(tài)性與中國(guó)北方漢族人