河南漢族人群凝血因子Ⅶ基因多態(tài)性與缺血性腦血管病的相關(guān)性研究.pdf

1、背景和目的 流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，高脂血癥、高血壓、吸煙、糖尿病及卒中家族史等是缺血性腦血管病(ischemic cerebrovascular disease,ICVD)發(fā)生的危險因素，但這些傳統(tǒng)的危險因素不能完全解釋和預(yù)測缺血性腦血管病的發(fā)生發(fā)展。近年來一些研究發(fā)現(xiàn)缺血性腦血管病是由遺傳因素與環(huán)境因素共同參與其發(fā)生發(fā)展的復(fù)雜疾病，其具體發(fā)病機(jī)制有待深入研究。 凝血因子Ⅶ(Factor Ⅶ，F(xiàn)Ⅶ)是外源性凝血途徑中的第一

2、個催化酶，外源性凝血途徑在血凝塊生成過程中扮演了很重要的角色。研究表明血漿中FⅦ水平升高是冠心病和缺血性腦血管病的危險因素，特別是與致命性心腦血管事件明顯相關(guān)。而血漿中FⅦ水平是由遺傳因素和環(huán)境因素相互作用共同決定的。FⅦ基因突變可以影響血漿FⅦ活性，從而影響心腦血管疾病的發(fā)生發(fā)展。 FⅦ基因被列為缺血性腦血管病的候選基因。為進(jìn)一步探討遺傳性高危因子基因多態(tài)性與缺血性腦血管病的關(guān)系，本文采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(

3、PCR-RFLP)技術(shù)，探討FⅦ基因R353Q多態(tài)性、5'F7多態(tài)性、ⅣS7多態(tài)性在中國河南漢族人群中的分布情況，并進(jìn)行缺血性腦血管病傳統(tǒng)危險因素和家族史調(diào)查，旨在探討基因多態(tài)性在缺血性腦血管病發(fā)生過程中的作用。 研究對象 1 病例組 選取缺血性腦血管病患者512例，來源于2004年12月至2005年7月河南省二甲以上醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院患者，男性310例，女性202例，平均年齡60．58±10．26歲。缺血性腦血

4、管病的診斷參照1995年中華醫(yī)學(xué)會第四屆腦血管會議修定的各類腦血管疾病診斷要點(diǎn)關(guān)于缺血性腦血管病的診斷標(biāo)準(zhǔn)。本研究人群均為河南漢族人。 2對照組 正常對照組選自同期門診體檢的健康隨機(jī)個體，共560例，其中男性304例，女性256例，年齡．58．68±11．03歲。經(jīng)詳細(xì)病史詢問，體格檢查及實驗室檢查均未見異常，并排除有心腦血管病或糖尿病家族史者。本研究人群均為河南漢族人。 方法 取外周抗凝靜脈血3ml，應(yīng)

5、用標(biāo)準(zhǔn)的酚．氯仿法提取白細(xì)胞基因組DNA。設(shè)計引物，采用PCR-RFLP技術(shù)擴(kuò)增目的片段及酶切擴(kuò)增產(chǎn)物，在2．5﹪的瓊脂糖凝膠中電泳，在紫外凝膠成像儀上檢測結(jié)果并拍照分析。 統(tǒng)計學(xué)處理 以基因計數(shù)法計算缺血性腦血管病患者與正常人群的基因型和等位基因頻率。用Hardy-Weinberg平衡及X<'2>檢驗評估標(biāo)本群體代表性。應(yīng)用SPSS 11．0軟件包作統(tǒng)計學(xué)處理。缺血性腦血管病組與正常人群之間基因型和等位基因頻率差異用X

6、<'2>檢驗，單倍型頻率計算應(yīng)用SHEsis軟件，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。 結(jié)果 1.基因多態(tài)性與缺血性腦血管病的關(guān)系 1．1 FVII基因R353Q多態(tài)性、5’F7多態(tài)性、IVS7多態(tài)性各基因型在ICVD組和對照組分布均符合Hardy-Weinberg平衡。 1．2在河南漢族正常人群中，此三個基因位點(diǎn)多態(tài)性的突變率均與其他地區(qū)和種族人群存在差異。 1．3在河南漢族人群中，F(xiàn)VII基因R353Q

7、多態(tài)性分布在ICVD組和對照組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；FVII基因5’F7多態(tài)性分布在ICVD組和對照組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，F(xiàn)VII基因IVS7多態(tài)性分布在ICVD組和對照組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。 2．單倍型與與缺血性腦血管病的關(guān)系 2．1在河南漢族人群中，F(xiàn)VII基因三個多態(tài)位點(diǎn)中，R-P<,0>-H6為最常見單倍型，其次是R-P<,0>-H7，有9種單倍型(Q-P<,0>-H4，Q-P<,0>-H5，Q-P<,0>-

8、H8，Q-P<,10>-H4，Q-P<,10>-H5，Q-P<,10>-H8，R-P<,10>-H4，R-P<,10>-H5，R-P<,10>-H8)未檢出。 2．2單倍型R-P<,0>-H6在病例組的分布頻率明顯高于對照組(P=0.023,OR=1.219，95﹪CI：1.028～1.446)；其他單倍型頻率在兩組間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)結(jié)論1 河南漢族人群中存在FVII R353Q、5’F7、IVS7位點(diǎn)多態(tài)性，