河南漢族人群血小板膜糖蛋白IaC807T基因多態(tài)性與缺血性腦血管病關(guān)系的相關(guān)性研究.pdf

1、背景與目的:
　　 腦血管病(cerebrovascular disease，CVD)是嚴重威脅我們?nèi)祟惤】档某Ｒ姴　⒍喟l(fā)病，且其發(fā)病率、致殘率、復(fù)發(fā)率、及死亡率逐年升高，給個人、家庭及社會帶來嚴重的經(jīng)濟及心理負擔。目前，腦血管病的大量危險因素已被確定，如高血壓、高血糖、血脂異常及吸煙等，然而在腦血管病中大約80％是缺血性腦血管病(ischemic cerebrovascular disease，ICVD)，至今其發(fā)病機制尚未完

2、全明了。我國屬于腦血管病的高發(fā)國家，并且發(fā)病越來越呈年輕化趨勢?，F(xiàn)階段對ICVD危險因素的研究已經(jīng)成為腦血管病防治的重要領(lǐng)域，近年來，分子生物學的飛速發(fā)展，為腦血管病的遺傳學研究開辟了新領(lǐng)域，ICVD的研究已進入分子水平。當前，醫(yī)學界應(yīng)當努力發(fā)現(xiàn)和鑒別ICVD的致病基因，健全預(yù)測ICVD發(fā)生的手段，盡早識別ICVD的高危人群，進而為ICVD患者提供更積極的防治策略。
　　 膠原在凝血和血栓形成過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用，它能與活化的血小

3、板結(jié)合并使之粘附于暴露的血管內(nèi)皮下。血小板膜糖蛋白(Glycoprotein，GP)基因多態(tài)性是血栓形成的危險因素，它通過其表面的膜糖蛋白受體GPIa(glycoprotein Ia，GPIa)復(fù)合物與膠原結(jié)合，產(chǎn)生有力的信號導(dǎo)致血小板的激活和聚集，最終導(dǎo)致血栓形成。近年來，在血小板膜GPIa基因編碼序列中807(C或T)和873(G或A)位點發(fā)現(xiàn)兩種多態(tài)性，且等位基因807T和873A是完全連鎖的，而后發(fā)現(xiàn)這兩種多態(tài)性和血小板膜GPI

4、a分子在血小板的表面水平明顯相關(guān)，因此推測血小板膜GPIa基因多態(tài)性可能是血栓性疾病的遺傳易感因素。目前國內(nèi)外關(guān)于血小板膜GPIaC807T基因多態(tài)性與ICVD相關(guān)性的研究結(jié)論不一，且較少大樣本實驗。因此，研究血小板膜GPIaC807T基因多態(tài)性與ICVD的相關(guān)性對腦血管病的防治有重要意義。本試驗通過分析ICVD患者和對照組GPIaC807T基因的多態(tài)性，了解其在中國河南地區(qū)漢族人群中的分布特點進而明確其與ICVD的關(guān)系，旨在從遺傳學方

5、面探討河南漢族人群ICVD的病因，從分子水平揭示其發(fā)病機制，探討該多態(tài)性是否是我省ICVD發(fā)生的遺傳風險因子，便于及早發(fā)現(xiàn)ICVD的危險人群，從而為ICVD的防治提供更多的基礎(chǔ)理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 選取2008年9月～2009年6月河南省內(nèi)二級甲等以上醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院患者317例，男171例，女146例，年齡38～75歲，平均年齡(56.5±18.5)，所有病人均行頭顱CT或MRIi正實。病例的診斷依據(jù)2006

6、年WHO確定的關(guān)于缺血性腦卒中的診斷標準。所有的入選患者歸為腦梗死組；根據(jù)發(fā)病年齡，把腦梗死組中≤55歲的患者歸為年齡≤55歲腦梗死組；依據(jù)Essen卒中危險評分(ESRS)及美國的Framingham卒中風險評估(FSP)標準，將腦梗死組中有高發(fā)風險的患者歸為高危腦梗死組。并隨機選取同期311例無心腦血管疾病家族史的健康體檢者作對照，男性165例，女性146例，年齡39～76歲，平均年齡(57.5±18.5)。全部受試者均為河南漢族人

7、，飲食結(jié)構(gòu)相似，各研究對象之間無血緣關(guān)系，兩組間在年齡、性別、血壓、血脂、血糖及吸煙等方面差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。所有研究對象均除外腫瘤、靜脈血栓形成、肝腎功能不全、接受器官移植及嚴重營養(yǎng)不良等疾病者。
　　 所有研究對象取晨空腹外周靜脈抗凝血3ml，應(yīng)用標準的酚-氯仿法提取白細胞基因組DNA。設(shè)計引物，采用PCR-RFLP(聚合酶鏈反應(yīng)-限制性內(nèi)切酶片段長度多態(tài)性)技術(shù)擴增目的片段及酶切產(chǎn)物，在2.5％的瓊脂糖溴化乙

8、錠凝膠中電泳，紫外凝膠成像儀上檢測結(jié)果并拍照進行分析。
　　 所有試驗結(jié)果均在SPSS13.0統(tǒng)計軟件包中建立數(shù)據(jù)庫，基因型和等位基因頻率采用頻率計數(shù)法計算，組間的基因型頻率、等位基因頻率分布分析及Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗的差異用x2檢驗，病例組和對照組間的基因型及等位基因相對風險率用比數(shù)比(Odds Ratios，OR)及95％可信區(qū)間表示。以α=0.05作為顯著性檢驗水準。
　　 結(jié)果:
　　

9、 1.中國河南漢族人群血小板膜GPIa基因編碼序列中第807位存在兩種等位基因(C或T)和三種基因型(CC，CT及TT)。
　　 2.病例組和對照組人群的基因型分布經(jīng)x2檢驗均符合Hardy-weinberg平衡，P＞0.05，具有人群代表性。
　　 3.T等位基因頻率及TT基因型頻率在對照組與腦梗死組間分布差異不具有統(tǒng)計學意義，P＞0.05；兩者在年齡≤55歲腦梗死組與對照組間及高危腦梗死組和對照組間的頻率分布差異具有