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文檔簡介
1、目的:精原細胞瘤(seminoma)是一種起病隱匿、病情兇險的睪丸惡性腫瘤。它起源于原始生殖細胞,是睪丸最常見的惡性腫瘤,一旦發(fā)病,如不及時治療,死亡率很高。因此早期發(fā)現(xiàn)和治療是治愈精原細胞瘤的關鍵。與其他惡性腫瘤一樣,精原細胞瘤的形成與發(fā)展是多步驟、多基因綜合作用的結果。腫瘤發(fā)生學上認為,腫瘤的發(fā)生過程中的一個重要環(huán)節(jié)就是各類基因表達發(fā)生改變,即細胞內(nèi)原癌基因的激活并過度表達以及抑癌基因的失活。因此,我們通過對Oct4、PLAP、VE
2、GF、p53基因的研究,從分子水平上研究精原細胞瘤惡變過程中癌基因、抑癌基因表達的改變,從而為早期明確診斷精原細胞瘤和治療精原細胞瘤提供分子生物學上的依據(jù)。 方法:應用免疫組化SP法,檢測Oct4、PLAP、VEGF、p53基因在38例精原細胞瘤中的表達,應用飽和酚一氯仿抽提11例石蠟組織DNA,應用PCR-SSCP法,檢測p53在精原細胞瘤中的突變及缺失情況。 結果: (1)Oct4在精原細胞瘤中的陽性表達率為100%
3、,在正常睪丸組織中不表達;PLAP在精原細胞瘤中的陽性表達率為89.47%,在正常睪丸組織中同樣不表達。同時根據(jù)顯微鏡下觀察,Oct4表達的切片背景色非常低;而PLAP表達的許多切片上,背景色較重。 (2)VEGF在精原細胞瘤臨床分期Ⅰ期的陽性表達率為33.33%,Ⅱ期的陽性表達率為90.91%,Ⅲ期的陽性表達率為100%。Ⅰ期與Ⅱ期、Ⅰ期與Ⅲ期各組間比較有統(tǒng)計學差異(p<0.01),Ⅱ期與Ⅲ期之間比較無統(tǒng)計學差異(p>0.05
4、);在10例正常睪丸組織中,2例弱陽性,8例陰性。p53在精原細胞瘤臨床分期Ⅰ期的陽性表達率為93.33%,Ⅱ期與Ⅲ期的表達率分別為54.55%和50%。Ⅰ期與Ⅱ期、Ⅰ期與Ⅲ期兩組間比較有統(tǒng)計學差異(p<0.05),Ⅱ期與Ⅲ期之間比較無統(tǒng)計學差異(p>0.05);10例正常睪丸組織均陰性。 (3)VEGF和p53基因在精原細胞瘤中的表達無相關性(r=0.183,p>0.05)。 (4)p53在精原細胞瘤中存在突變,突變
5、率為45.45%。 結論: 1、Oct4在精原細胞瘤中均呈陽性表達,是一個優(yōu)秀的診斷精原細胞瘤的標記基因,與PLAP相比更加靈敏。 2、隨著精原細胞瘤的臨床分期的進展,VEGF的陽性表達率越來越高,提示VEGF在精原細胞瘤的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮著重要作用:p53在調(diào)控精原細胞瘤發(fā)展過程中,主要在臨床分期的早期起重要作用;精原細胞瘤中,p53與VEGF不存在相關性。 3、p53在精原細胞瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中,存
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