金魚和鯽PTX3基因的克隆、表達及功能的初步研究.pdf

1、金魚是由我國野生鯽演變而來的一類觀賞魚類，頭瘤類金魚是其眾多品系中重要的一類。頭瘤類金魚的觀賞價值和經(jīng)濟價值受頭瘤形狀、大小和顏色等的影響，然而其頭瘤的產(chǎn)生機制尚不清楚。目前的研究普遍認為頭瘤是組織的異常增生。最近的研究發(fā)現(xiàn)，隨著頭瘤的發(fā)生，PTX3（Pentraxin3）基因的表達水平上調(diào)，證明PTX3在金魚頭瘤發(fā)生過程中可能發(fā)揮著重要作用;而PTX3在哺乳動物中發(fā)揮著類抗體、結(jié)合特定病原菌、激活并調(diào)控補體等免疫相關(guān)作用。因此我們推測

2、，在頭瘤的異常增生過程中，PTX3可能作為免疫相關(guān)因子對其發(fā)揮持續(xù)免疫的作用。為驗證這一推論，我們對魚類中的PTX3開展了相關(guān)研究。主要研究結(jié)論如下:
　　1.PTX3在基因結(jié)構(gòu)和蛋白結(jié)構(gòu)上具有保守性。金魚和異育銀鯽PTX3基因均由3個外顯子和2個內(nèi)含子構(gòu)成。金魚的兩個內(nèi)含子分別長945bp，1519bp;異育銀鯽的兩個內(nèi)含子分別長970bp，1513bp。金魚和異育銀鯽PTX3基因cDNA序列全長分別為1918bp，1560bp

3、，均包含了一個1362bp的開放閱讀框，編碼453aa的蛋白質(zhì)。預測的PTX3蛋白由信號肽(1-22aa)、氨基端(23-240aa)和PTX結(jié)構(gòu)域(241-453aa)三部分構(gòu)成，在PTX結(jié)構(gòu)域有一非典型的Pentraxin信號(HICAVWSS)。兩種魚類編碼的PTX3氨基酸序列高度同源，僅有兩個氨基酸不同。
　　2.PTX3在異育銀鯽各組織中均有表達，在腦和肌肉中的表達量最高。在嗜水氣單胞菌感染后，PTX3在肝臟、脾臟、頭腎