體外培養(yǎng)樹突狀細胞的實驗研究.pdf

1、目的：提取神經膠質瘤患者外周血分離出單核細胞，進行體外培養(yǎng)、誘導產生樹突狀細胞，并探討細胞因子對樹突狀細胞誘導、分化成熟的影響，為最終臨床應用樹突狀細胞免疫治療神經膠質瘤打下基礎。 方法：臨床收集確診為神經膠質瘤的患者靜脈血共20份，每份20ml，經淋巴細胞分離液梯度分離出單個核細胞（PBMC），貼壁法獲得單核細胞后，每個樣本均分為兩份，共兩組，分別加入GM-CSF+IL-4和GM-CSF+IL-4+Flt3-L進行誘導，在相同

2、條件下進行體外培養(yǎng)，隔日半量換液，補充細胞因子，共7天，用倒置顯微鏡觀察其形態(tài)，并進行流式細胞儀檢測其表面標志，對培養(yǎng)結果在獲得率、純度和細胞表型三方面進行對比。 結果：應用GM-CSF+IL-4和GM-CSF+IL-4+Flt3-L兩種培養(yǎng)方法均可誘導產生樹突狀細胞,而且在樹突狀細胞的獲得率和純度方面無統(tǒng)計學差異，經流式細胞儀檢測，應用GM-CSF+IL-4組所獲得的樹突狀細胞符合不成熟樹突狀細胞的表型，而GM-CSF+IL-