樹突狀細(xì)胞瘤苗抗腫瘤功能的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文樹突狀細(xì)胞瘤苗抗腫瘤功能的實(shí)驗(yàn)研究姓名：聶紅永申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：段玉芹;許彥枝20070301中文摘要養(yǎng)健康人外周血單核細(xì)胞獲得成熟D C ，以T c a 8 1 1 3 人舌黏膜鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞凍融抗原致敏D C 制備瘤苗。觀察其對(duì)荷瘤裸鼠的抑瘤作用，來(lái)探討樹突狀細(xì)胞疫苗用于口腔鱗癌患者免疫治療的可行性。方法：取健康志愿者抗凝外周血2 0 m l ，常規(guī)分離外周血單核細(xì)胞( p e r

2、 i p h e r a l b l o o d m o n o c y t e s ，P B M C ) ，用含1 0 ％胎牛血清的R P M l l 6 4 0 培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為1 ×1 0 7 個(gè)／m l ，然后接種于6 孔板，每孔3 m l 。5 ％C O ：，3 7 ℃條件下孵育2 ～3 h 后，吸出培養(yǎng)上清，用預(yù)熱的培養(yǎng)基清洗板1 次，以去除非貼壁細(xì)胞( 凍存) ，獲得貼壁的單核細(xì)胞，用重組人粒細(xì)胞一巨噬細(xì)胞集

3、落刺激因子( r h G M ．C S F ) 、重組人白細(xì)胞介素4 ( r h l L 一4 ) 、重組人腫瘤壞死因子Q ( r h T N F ．Q ) 協(xié)同誘導(dǎo)人外周血單核細(xì)胞成為成熟D C 。T c a 8 3 舌癌細(xì)胞可溶性抗原體外致敏D C ，將同源人T 淋巴細(xì)胞與之共同培養(yǎng)誘導(dǎo)出抗原特異性的細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞f C n ．s ) ，共同接種至荷瘤裸鼠體內(nèi)行免疫治療。結(jié)果：人外周血單核細(xì)胞在細(xì)胞因子協(xié)同誘導(dǎo)下可獲得功能正常

4、的D C ，用致敏D C + C T L s 免疫治療的荷瘤裸鼠與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組腫瘤生長(zhǎng)速度減慢，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)( 第2 1天) 腫瘤體積明顯小于對(duì)照組，明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)( P < 0 ．0 5 ) 。繪制兩組裸鼠腫瘤生長(zhǎng)曲線，對(duì)照組腫瘤生長(zhǎng)曲線較陡，上升幅度較大，實(shí)驗(yàn)組腫瘤生長(zhǎng)曲線呈緩慢下降趨勢(shì)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)實(shí)驗(yàn)組的抑瘤率為2 6 ．1 6 ％，與對(duì)照組行配對(duì)t 檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < 0 ．0 5 ) 。結(jié)論：采