不同膽汁引流方式對梗阻性黃疸大鼠腸黏膜機械屏障功能的影響及機制.pdf

1、目的:本實驗建立梗阻性黃疸(OJ)大鼠模型，并對此模型施行不同的膽汁引流方式—膽汁內(nèi)引流術(shù)和膽汁外引流術(shù)。通過觀察術(shù)后各組大鼠腸黏膜組織形態(tài)學(xué)變化，檢測血清中內(nèi)毒素水平、腸黏膜細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表達(dá)以及腸黏膜組織緊密連接相關(guān)蛋白—閉鎖蛋白和閉鎖小帶蛋白-1(ZO-1)的表達(dá)，探討不同膽汁引流方式對OJ大鼠腸黏膜機械屏障功能的影響及機制。從而為臨床上對OJ患者選擇何種膽汁引流方式提供

2、一定的理論依據(jù)。
　　方法:將60只SD大鼠采用膽總管結(jié)扎法制作OJ模型，1周后隨機均分為無引流組（不行膽汁引流術(shù)），內(nèi)引流組（行膽汁內(nèi)引流術(shù)）和外引流組（行膽汁外引流術(shù)），引流時間為1周。以20只假手術(shù)大鼠為對照組，實驗時間共2周，結(jié)束時分別用ELISA法、IHC法和Western blot法檢測各組大鼠血清內(nèi)毒素水平、腸黏膜細(xì)胞PCNA和Caspase-3的表達(dá)和腸黏膜組織閉鎖蛋白及ZO-1的表達(dá)，并觀察腸黏膜組織形態(tài)學(xué)改變。

3、
　　結(jié)果:
　　1、血清內(nèi)毒素水平的變化:無引流組和外引流組OJ大鼠血清內(nèi)毒素水平明顯升高，與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，而無引流組與外引流組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義;內(nèi)引流組較無引流組和外引流組明顯下降，基本接近對照組水平。
　　2、腸黏膜細(xì)胞PCNA的表達(dá):無引流組、內(nèi)引流組和外引流組OJ大鼠腸黏膜細(xì)胞PCNA的表達(dá)明顯下降，與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，而內(nèi)引流組和外引流組較無引流組明顯升高，差異有統(tǒng)計

4、學(xué)意義;內(nèi)引流組較外引流組亦明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3、腸黏膜細(xì)胞Caspase-3的表達(dá):無引流組、內(nèi)引流組和外引流組OJ大鼠腸黏膜細(xì)胞Caspase-3的表達(dá)明顯升高，與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，而內(nèi)引流組和外引流組較無引流組明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;內(nèi)引流組較外引流組亦明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4、腸黏膜組織緊密連接相關(guān)蛋白—閉鎖蛋白和ZO-1的表達(dá):與對照組比較，無引流組和外引流組OJ大鼠腸

5、黏膜上皮細(xì)胞間緊密連接相關(guān)蛋白—閉鎖蛋白和ZO-1的表達(dá)均明顯降低，且外引流組兩者表達(dá)水平降低尤為明顯，與無引流組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;內(nèi)引流組的表達(dá)水平明顯高于無引流組和外引流組，基本接近對照組。
　　5、腸黏膜的光鏡表現(xiàn):無引流組和外引流組OJ大鼠腸黏膜結(jié)構(gòu)破壞，大量或中量炎性細(xì)胞浸潤，而內(nèi)引流組OJ大鼠組腸黏膜結(jié)構(gòu)完整，僅見少量炎性細(xì)胞浸潤。
　　結(jié)論：膽汁內(nèi)引流對OJ大鼠腸黏膜機械屏障具有保護作用，其機制可能與膽汁