上消化道壁全層結扎術后的愈合觀察.pdf

1、內鏡下全層結扎上消化道壁技術，主要用于直徑小于12mm上消化道固有肌層腫瘤的治療。多為平滑肌瘤和間質瘤，是消化系統(tǒng)常見的病變。消化道固有肌層腫瘤的治療，大體包括：外科開腹手術切除、腹腔鏡介入下切除及內鏡下結扎治療，幾種方法各有優(yōu)勢。對于較小腫瘤(直徑≤12mm)，內鏡下結扎方法較佳，其創(chuàng)傷小、恢復快，費用低。目前消化道固有肌層腫瘤的內鏡下結扎治療已在臨床上應用數(shù)年，并取得了較好效果，已有較多文獻進行報導。但在固有肌層腫瘤結扎后的結扎瘤觀

2、察大都是定期胃鏡下胃內觀察，觀察結扎瘤的脫落和黏膜層的愈合情況，而沒有結扎處消化道壁愈合的微觀觀察結果。本試驗是從病理學角度微觀的觀察消化道壁全層結扎后，結扎處愈合過程。即結扎瘤脫落時和脫落后結扎處的愈合狀態(tài)對比，觀察結扎瘤脫落時間和漿膜粘連時間，評估結扎的風險、探討結扎治療術的安全性和可靠性。 實驗材料： 1、實驗動物 普通實驗狗、體重大約15-20kg，由中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院動物實驗室提供。 2、

3、主要試劑 maiyers蘇木素；75％、80％、85％、90％、95％、100％酒精；二甲苯；1％曙紅(伊紅、廣州齊云生物制品公司)；1％鹽酸酒精；PBS(枸櫞酸緩沖液)；苦味酸復紅；3％雙氧水；一抗(武漢博士德公司)；二抗(Sigma公司)； 3、實驗設備 普通胃鏡：Pentax EG2940；結扎器：空氣驅動式結扎器(單環(huán)釋放器)；負壓吸引器；病理鉗、異物鉗、注射器等； 4、化驗設備 顯微鏡

4、OLYMPUSBX41型；切片機SHANDON finess；全自動脫水機SHANDON thermo Electron型；石蠟包埋機LeicaEG1150H；冰箱；溫箱；恒溫攤片烤片機TK-218VIH；石蠟切片用冷臺ZH-3H；電熱鼓風干燥箱HN101-2AD； 實驗方法： (1)將4只實驗狗隨機編號為：A、B、C、D。將實驗狗行內鏡下上消化道壁全層結扎術。每條實驗狗每日結扎1次，次日結扎時同時觀察前1次結扎瘤變化情

5、況，第3次結扎時同時觀察前2次結扎瘤變化情況，以此類推。直至首次結扎瘤脫落，并延續(xù)至首次結扎后1周時結扎結束。麻醉下處死實驗狗，取實驗狗的胃結扎處消化道壁全層置于10％福爾馬林溶液中，標記結扎后的時間。 (2)選擇結扎部位取材，石蠟包埋并切片。分別行HE染色；Van Gieson(膠原纖維)染色法；免疫組化染色：SP法(鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法)。 (3)電子顯微鏡下觀察切片，統(tǒng)計膠原蛋白含量及毛細血管數(shù)量，

6、使用計算機Bandscan灰度分析軟件分析部分實驗結果，形成定量比較。 實驗結果： (1)內鏡下觀察結扎后不同時間結果：上消化道壁全層結扎術后，結扎瘤脫落時間平均為3-4天。脫落后，黏膜面觀察為1處較深潰瘍，1周后，潰瘍愈合為紅色瘢痕。 (2)結扎處取材切片染色后觀察結果：上消化道壁全層結扎術后，結扎部位膠原蛋白含量及毛細血管數(shù)量，1-3天內顯著升高，至第3-4達高峰，5-7天出現(xiàn)持續(xù)狀態(tài)。即結扎處兩側漿膜層間3