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1、目的:觀察白色假絲酵母菌的體內(nèi)外生物膜的形成、結(jié)構(gòu)形態(tài)模型,并證明其強(qiáng)大的耐藥性,并研究相關(guān)藥物對(duì)生物膜作用的機(jī)理,探討藥物治療呼吸道白色假絲酵母菌生物膜感染的可行性。 方法:建立白色假絲酵母菌生物膜的體外模型,通過(guò)光鏡、激光共聚焦顯微鏡觀察體外生物被膜的結(jié)構(gòu)及藥物干預(yù)后的生物膜形態(tài)。利用掃描電鏡觀察大鼠體內(nèi)生物膜模型。通過(guò)半定量RT-PCR方法測(cè)定相關(guān)藥物干預(yù)后生物膜菌絲相蛋白(hwpl)表達(dá)變化情況。利用XTT減低法測(cè)定白色
2、假絲酵母菌生物膜的代謝動(dòng)力學(xué)并證明生物膜的耐藥性,并了解相關(guān)藥物對(duì)白色假絲酵母菌生物膜的干預(yù)情況。 結(jié)果:①成功建立白色假絲酵母菌的體外生物膜,激光共聚焦顯微鏡下觀察到酵母細(xì)胞沿著菌絲形成團(tuán)塊樣聚集,生物膜生長(zhǎng)成多層的膜狀結(jié)構(gòu):阿司匹林沒(méi)有明顯抑制生物膜的菌絲,而氟康唑和姜黃油可以明顯抑制生物被膜的菌絲形成。②證明白色假絲酵母菌生物膜具有強(qiáng)大的耐藥性,阿司匹林和姜黃油各濃度對(duì)生物膜均有抑制作用,1mmol/1的阿司匹林對(duì)48小時(shí)
3、后的生物膜無(wú)明顯抑制作用,10%姜黃油對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)生長(zhǎng)的生物膜均有抑制作用;③掃描電鏡下成功觀察到大鼠體內(nèi)導(dǎo)管內(nèi)的生物膜呈菌絲相互交織成膜網(wǎng)狀的空間結(jié)構(gòu);④藥物干預(yù)下,阿司匹林組的hwpl蛋白未見(jiàn)明顯抑制,氟康唑和姜黃油組的hwpl蛋白抑制明顯,這與共聚焦顯微鏡觀察到的結(jié)果一致。 結(jié)論:呼吸道白色假絲酵母菌生物膜具有強(qiáng)大的耐藥性,大鼠白色假絲酵母菌體內(nèi)生物膜的形態(tài)得到證實(shí),阿司匹林、姜黃油可能為今后治療真菌生物膜的感染提供了實(shí)驗(yàn)
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