IL-22對(duì)SW982細(xì)胞增殖、凋亡及關(guān)節(jié)重塑相關(guān)基因表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)研究不同濃度IL-22對(duì)SW982細(xì)胞增殖、調(diào)亡及關(guān)節(jié)重塑相關(guān)基因(OPG、MMP13、VEGF和IL-1β)mRNA表達(dá)的影響。
　　方法:體外用含有10％FBS的DMEM高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)人滑膜細(xì)胞系SW982，再將細(xì)胞種入12孔板，待細(xì)胞貼壁后無(wú)血清處理24h，再次加入Nil(Control)和IL-22(0.1ng/mL、1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL和40ng/mL)進(jìn)行干預(yù)，用MTT

2、的方法檢測(cè)加入IL-22后12h、24h、48h和72h細(xì)胞活力的變化;在CFSE處理細(xì)胞后用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)加入IL-22后0h、12h、24h、48h和72h細(xì)胞增殖的變化;加入IL-22干預(yù)48h后用Trizol法提取每組細(xì)胞RNA，并反轉(zhuǎn)錄為cNDA，再用real-timePCR技術(shù)檢測(cè)每組關(guān)節(jié)重塑相關(guān)基因OPG、MMP13、VEGF和IL-1β mRNA水平的變化;加入IL-22干預(yù)48h后用Annexin V-FITC和PI雙

3、染細(xì)胞在運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡的變化;加入IL-22干預(yù)48h后用200μM(μmol/L)H2O2誘導(dǎo)SW982細(xì)胞凋亡24h，Annexin V-FITC和PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡的變化。應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異有顯著性標(biāo)準(zhǔn)為P＜0.01。
　　結(jié)果:(1)不同濃度IL-22在0-72h之間對(duì)SW982細(xì)胞活力沒(méi)有影響。(2)不同濃度IL-22在0-72h之間對(duì)SW982細(xì)胞增殖沒(méi)有影響。(3

4、)不同濃度IL-22(5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL和40ng/mL)對(duì)SW982具有抗凋亡的作用。(4)濃度為10ng/mL的IL-22可使關(guān)節(jié)重塑相關(guān)基因(OPG、MMP13、VEGF和IL-1β)mRNA表達(dá)發(fā)生顯著的變化。(5)濃度為10ng/mL的IL-22對(duì)H2O2誘導(dǎo)SW982細(xì)胞的凋亡過(guò)程具有保護(hù)的抗凋亡作用。
　　結(jié)論:不同濃度IL-22在0-72h之間對(duì)SW982細(xì)胞活力及增殖沒(méi)有影響;5ng/m