冬蟲夏草中活性成分及魚肉中甲基汞的HPLC檢測技術(shù)研究.pdf

1、高效液相色譜（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）檢測技術(shù)以其高效、高速和高靈敏度等特征，成為一種優(yōu)異的分離分析方法，其與各種檢測器的聯(lián)用已被廣泛應(yīng)用于生物工程、食品工業(yè)、環(huán)境檢測等領(lǐng)域。本研究分為四個(gè)部分：
　　第一部分：HPLC-PDA法測定冬蟲夏草中的多糖肽。
　　目的：建立一種直接測定冬蟲夏草多糖肽的HPLC-PDA法。
　　方法：采用HPLC-PDA和水提醇

2、沉法，以Atlantis T3柱（4.6×250mm，5μm）為色譜柱，柱溫35℃，流動相為體積分?jǐn)?shù)為5％的甲醇水溶液，流速為1.0mL/min，進(jìn)樣量為10μL，掃描波長為190nm—460nm。
　　結(jié)果：平均回收率為96.4%，RSD為0.78%，測得樣品中多糖肽含量為16.8 mg/g。
　　結(jié)論：該方法簡單、快速、準(zhǔn)確，回收率較高，為測定冬蟲夏草保健品中多糖肽提供了可靠方法。
　　第二部分：HPLC-PDA法

3、同時(shí)測定冬蟲夏草中腺苷和蟲草素。
　　目的：建立一種同時(shí)測定冬蟲夏草中腺苷、蟲草素含量的HPLC-PDA法。
　　方法：用HPLC-PDA法檢測，腺苷和蟲草素用流動相超聲提取，以UltimateTM AQ-C18柱(4.6×250mm,5?m)為色譜柱，柱溫30℃，流動相為甲醇:0.01 mol/L磷酸二氫鉀溶液=10:90(V/V)，流速為1.0ml/min，進(jìn)樣量為20μL，檢測波長為260nm。
　　結(jié)果：腺苷、

4、蟲草素線性范圍為1.0~100.0μg/mL，平均回收率分別為99.4%（RSD為0.48%）、97.8%（RSD為3.85%），測得樣品中腺苷、蟲草素含量分別為2.236mg/g、0.101mg/g。
　　結(jié)論：流動相配比簡單，回收率高，能夠?qū)崿F(xiàn)對冬蟲夏草及其保健品中腺苷和蟲草素兩種主要核苷類活性成分的同時(shí)快速準(zhǔn)確測定。
　　第三部分：HPLC-ESI-MS法同時(shí)測定冬蟲夏草中腺苷、蟲草素和蟲草酸。
　　目的：建立一

5、種同時(shí)測定冬蟲夏草中的腺苷、蟲草素和蟲草酸的HPLC-ESI-MS法。
　　方法：采用HPLC-MS聯(lián)用法、選擇性離子檢測(SIM)和電噴霧離子化(ESI)，腺苷、蟲草素和蟲草酸用純水超聲提取，Thermo BioBasic-18 PIONEER(150 mm×2.1 mm，5μm)為色譜柱，柱溫為30℃，流動相為0.05 mol/L甲酸-甲醇(94:6)(V/V)，流速為0.2mL/min，進(jìn)樣量為5μL。
　　結(jié)果：腺苷

6、、蟲草素和蟲草酸的線性范圍分別是10～50μg/mL、10～50μg/mL、100～500μg/mL，平均回收率分別為96.56%（RSD為2.75%）、96.27%（RSD為2.60%），97.45%（RSD為2.34%），檢測限分別為0.16μg/mL、0.23μg/mL、7.3μg/mL，測得樣品中腺苷、蟲草素和蟲草酸的平均含量為0.74mg/g、0.22mg/g、5.1mg/g。
　　結(jié)論：該方法簡單而快速，可用于蟲草保健

7、品的質(zhì)量控制和混偽品的便捷鑒別。
　　第四部分：HPLC-AFS法測定魚肉中甲基汞。
　　目的：建立測定魚肉中甲基汞(MeHg）含量的高效液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用法（HPLC-AFS）。
　　方法：采用HPLC-AFS檢測，色譜柱為C18反相色譜柱（150×4.6 mm，5μm），柱溫30℃，流動相為乙腈（5.0%，V/V）+乙酸銨（0.462%，m/V）+半胱氨酸(0.12%，m/V)，流速為1.0mL/min，進(jìn)