冬蟲夏草人工培養(yǎng)條件及有效活性成分研究.pdf

1、冬蟲夏草是我國名貴的中藥材,而蛹蟲草是第一個能完全實(shí)現(xiàn)人工栽培的蟲草屬真菌。實(shí)現(xiàn)蛹蟲草的大規(guī)模培養(yǎng)是解決蟲草資源匱乏的有效途徑之一。本實(shí)驗(yàn)從實(shí)驗(yàn)室保藏的三株蛹蟲草菌株出發(fā),對蛹蟲草的人工培養(yǎng)及有效成分分析做了如下工作:
　　1.以蛹蟲草菌絲形態(tài),及液體和固體發(fā)酵能力為指標(biāo),對實(shí)驗(yàn)室保藏的三株菌株進(jìn)行篩選,得到 C3菌株的菌絲生長健壯、液體和固體發(fā)酵能力優(yōu)良。因此,將 C3菌株作為實(shí)驗(yàn)菌株。
　　2.實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),蛹蟲草菌株極易退

2、化,退化后的菌株表現(xiàn)出液體發(fā)酵副產(chǎn)物增多、固體發(fā)酵周期延長及固體發(fā)酵不產(chǎn)子實(shí)體等現(xiàn)象。本實(shí)驗(yàn)從常規(guī)保藏方法入手,得到保藏蛹蟲草的最佳培養(yǎng)基為PDA培養(yǎng)基,于4℃低溫保藏時間不宜超過4個月,4個月后就要活化一次,活化傳代次數(shù)不宜超過4代。
　　3.通過對蛹蟲草液體發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件的單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn),得到蛹蟲草液體發(fā)酵最佳培養(yǎng)基為:蔗糖2.0％,蛋白胨0.8％,KH2PO40.5％,MgSO40.25％。最佳發(fā)酵條件為:種齡為

3、120h(五天),接種量為10％,發(fā)酵液初始pH自然,裝液量為200ml/500ml,搖床轉(zhuǎn)速為130 r/min,培養(yǎng)溫度為24℃;在最佳發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件下,得到最大菌絲生物量為13.9g/L,多糖量為46.8mg/g。
　　4.對蛹蟲草固體發(fā)酵生產(chǎn)子實(shí)體的碳源、氮源和料液比進(jìn)行了單因素實(shí)驗(yàn),得到最佳碳源為麥仁,最佳氮源為蠶蛹粉,最佳料液比為1:1.2;對蛹蟲草出草期子實(shí)體的光溫條件進(jìn)行了優(yōu)化,得到適宜子實(shí)體生長的溫度為24