重組人生長(zhǎng)激素對(duì)梗阻性黃疸大鼠腸黏膜緊密連接蛋白claudin-3及PKA的影響.pdf

1、目的：
　　對(duì)梗阻性黃疸早期應(yīng)用重組人生長(zhǎng)激素(recombinant human growthhormone，rhGH)的實(shí)驗(yàn)研究基礎(chǔ)上，采用梗阻性黃疸大鼠模型，模擬臨床上梗阻性黃疸患者腸黏膜上皮損傷的病理生理機(jī)制，研究緊密連接蛋白(tight junction associated protin,TJP)claudin-3和蛋白激酶-A（protein kinase A，PKA)在梗阻性黃疸大鼠腸黏膜的表達(dá)，探討其作用機(jī)制。<

2、br>　　方法：
　　將63只健康wistar大鼠，雌雄不分，隨機(jī)分為5組： I=假手術(shù)組（sham operated，簡(jiǎn)稱(chēng)SO組）共計(jì)15只；II=膽總管結(jié)扎（common bile duct ligation，簡(jiǎn)稱(chēng)CBDL)7天組共計(jì)12只；III=CBDL14天組共計(jì)11只；IV=CBDL+rhGH（簡(jiǎn)稱(chēng)rhGH組）7天組共計(jì)13只；V=rhGH14天組共計(jì)12只。CBDL組與rhGH組麻醉后游離出膽總管后用4.0絲線(xiàn)結(jié)扎，

3、使膽總管被阻斷，制成梗阻性黃疸模型組。rhGH組從術(shù)后第一天開(kāi)始每日予腹腔內(nèi)注射rhGH（上海復(fù)蒙基因生物科技有限公司提供），SO組及CBDL組以等量的生理鹽水作對(duì)照。實(shí)驗(yàn)7天及14天后分別檢測(cè)各組肝功能指標(biāo)的變化及應(yīng)用免疫組化、光鏡下半定量分析等方法觀察末端回腸小腸黏膜形態(tài)學(xué)改變，并觀測(cè)緊密連接蛋白claudin-3及PKA在末端回場(chǎng)黏膜上皮細(xì)胞上的表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：
　

4、　1）CBDL組、rhGH組較SO組相比，TBIL、DBIL、ALT水平有顯著增高（P<0.05）；CBDL組與rhGH組相比TBIL、DBIL、ALT水平顯著增高，有差異性（P<0.05）；CBDL14天組較CBDL7天組各項(xiàng)肝功能水平增高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；rhGH組隨時(shí)間的延長(zhǎng)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　2）CBDL組、rhGH組較SO組相比，腸黏膜嚴(yán)重?fù)p傷，有顯著的差異性（P<0.05）；CBDL組隨梗

5、阻時(shí)間推移腸黏膜損傷程度進(jìn)行性加重（P<0.05）；rhGH組較CBDL組各時(shí)段腸黏膜損傷程度明顯降低，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；rhGH組隨時(shí)間的推移無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　3）CBDL組、rhGH組較SO組相比腸黏膜緊密連接蛋白claudin-3的表達(dá)水平顯著降低，有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；CBDL組較rhGH組各時(shí)段claudin-3的表達(dá)水平顯著降低，有差異性（P<0.05）；rhGH組中隨

6、時(shí)間的延遲，claudin-3的表達(dá)水平略有增高，但無(wú)顯著差異（P>0.05）；CBDL組中隨著時(shí)間的推移claudin-3的表達(dá)水平降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　4）CBDL組、rhGH組較SO組相比腸黏膜緊密連接蛋白PKA的表達(dá)水平顯著增高，有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；CBDL組較rhGH組各時(shí)段PKA的表達(dá)水平顯著增高，有差異性（P<0.05）；rhGH組中隨時(shí)間的延遲，PKA的表達(dá)水平略有減低，但無(wú)顯著