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1、青島大學(xué)碩士學(xué)位論文雙酚A對大鼠睪丸緊密連接蛋白Occludin的體外影響姓名：馮友亮申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)(泌尿外科)指導(dǎo)教師：王新生20120602AbstractInvitroeffectofBPAonexpressionofoccludinattightjunctionofrattestisObjectiveToinvestigatetheeffectsofBisphenolA(BPA)onexpressionofocc
2、ludinofSertolicellinvitro，detectingthemechanismofimpairmentofspermatogenesisbytheBPAMethodsPrimarysertolicellswereisolatedandculturedfromWistarratfor4“5days，andthetightjunction(TJ)permeabilitybarrierwasestablishedbydualc
3、hamberculturemodelW池aseriesofconcentrationBPA(10。I_tmol／L，10叫Itmol／L，10qItmol／L，100I_tmol／L，101tmol／L，102Itmol／L，103tmol／L)andOI％DMEM(withoutfetalbovineserum)CO—incubatingtheSertolicellsinvitrofor24hcellproliferativeacti
4、vityWasassessedwithCCK8assayThemediandoselethal(LD50)ofBPAonSertolicellswas150pmol／LAseriesofconcentrationBPA(25ttmol／L，501amol／Landl00Itmol／L)wereselectedbyLD50asthefollowingexperimentalgroupand，dimethylsulfoxide(OI％DMS
5、O)wasusedtobethecontrolgroupCellsweretreated誠廿lOlamol／L(0I％DMSO)，25_tmol／L，50Itmol／Land100ItmoFLBPAfor24htheexpressionofoccludinWasdetectedrespectivelybyimmunofluorescenceandWesternblotanalysisResultsPrimaryWistarratsert
6、olicellswereisolatedandculturedsuccessfullyTJpermeablitybarrierwasestablishedperfectlyCCK8assayshowedthatabsorbance(ODvalue)ofcellsdroppedsignificantlywiththeincreasingdruguseCompared、j~ritllthecorrespondingcontrolgroupO
7、dsdecreasedmoresignificantlyat102IItmol／L，103Itmol／LBPAgroup(Po05)，however，10。Ⅵmo兒，100l上mol／L，101ltmol／LBPAgrouphadnostatisticalsignificance(P005)Immunofluorescentmicroscopyshowedthat，thelocalizationofoccludinwasshownine
8、achgroupTheintensityofoccludinimmunostainingWasgraduallydecreasedwiththeincreasingdosesofBPA，especiallythe251maol／Land50眥nol／LBPAgroup(P005)nleintensityofoccludinimmunostainingWasdramaticallydecreasedat251maol／L，501maol／
9、LBPAgroup(P005)and，thereWasnostrongoccludinpositivityOnlyafewoccludinexhibitedweaklypositiveinlOOgmol／Lgroup(PO05)WesternblottingshowedthatoccludinWasexpressedineachgroup，theexpressionofoccludindecreasedwiththeincreasing
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