組培條件下蘋果潛隱性病毒的分布特征及傳播途徑研究.pdf

1、目前，我國(guó)蘋果的栽培面積和總產(chǎn)量均居世界前列，但單產(chǎn)低，品質(zhì)差，病毒病是造成這一現(xiàn)象的重要原因之一。許多研究者提出，實(shí)行無(wú)毒化栽培可從根本上防治蘋果病毒病。目前蘋果無(wú)毒苗大多來(lái)自于離體保存的無(wú)病毒原種。但實(shí)際生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)，無(wú)病毒原種經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間的保存和擴(kuò)繁，會(huì)出現(xiàn)病毒再次檢出現(xiàn)象，這就給蘋果無(wú)毒化生產(chǎn)帶來(lái)一定的安全隱患。為此，準(zhǔn)確掌握組培條件下蘋果潛隱性病毒的體內(nèi)分布、含量變化因素及傳播途徑，有利于明確無(wú)病毒原種的適宜保存條件和更好地預(yù)防病毒

2、傳播，進(jìn)而推進(jìn)無(wú)毒化栽培的進(jìn)程。本研究以帶毒蘋果組培苗為試材，運(yùn)用FQ-PCR和常規(guī)RT-PCR技術(shù)，研究分析了組培苗中蘋果潛隱性病毒的分布和含量變化規(guī)律及病毒傳播途徑。主要結(jié)果如下:
　　1.組培條件下ASGV和ACLSV的分布與含量變化的研究
　　試驗(yàn)以同時(shí)攜帶ASGV和ACLSV的蘋果砧木組培苗P22為試材，運(yùn)用FQ-PCR技術(shù)，研究了組培苗不同部位以及不同培養(yǎng)天數(shù)和培養(yǎng)溫度下上述兩種病毒的含量變化。結(jié)果表明:

3、　　(1)在組培條件下，兩種病毒在不同部位的相對(duì)含量存在顯著差異，且病毒種類不同，分布規(guī)律亦不同。其中，ASGV在頂端1cm、中部、基部1cm的相對(duì)含量由高至低為頂端＞中部＞基部，表現(xiàn)為中上部積累特性;而ACLSV相對(duì)含量表現(xiàn)為基部＞中部＞頂部的中下部積累特性。
　　(2)不同培養(yǎng)溫度下組培苗內(nèi)ASGV和ACLSV的含量存在差異。ASGV和ACLSV含量由高至低均表現(xiàn)為:5℃＞25℃＞32/38℃＞35℃。在低溫培養(yǎng)下蘋果病毒含量

4、較高，高溫抑制病毒復(fù)制。
　　2.變溫處理對(duì)蘋果潛隱性病毒的脫除效果研究
　　試驗(yàn)以同時(shí)攜帶ASGV、ASPV、ACLSV的八棱海棠、小金海棠、華紅和JAZZ4個(gè)砧木和品種組培苗為試材，采用32/38℃的變溫處理，運(yùn)用RT-PCR技術(shù)對(duì)組培苗進(jìn)行跟蹤檢測(cè)，結(jié)果表明:
　　變溫處理后檢測(cè)無(wú)毒的苗子仍有病毒復(fù)現(xiàn)的可能。其中ASGV最先檢出，其次為ACLSV，ASPV檢出時(shí)間最晚。對(duì)變溫處理脫毒后的苗子進(jìn)行跟蹤檢測(cè)、定期抽檢

5、或更新十分必要。
　　3.組培條件下ASGV和ACLSV的傳播途徑研究
　　試驗(yàn)以同時(shí)攜帶ASGV和ACLSV的蘋果砧木組培苗P22和珠美海棠無(wú)毒組培苗為試材，人為模擬了5種方式進(jìn)行傳毒，研究了組培條件下病毒可能的傳播途徑及傳毒速度。結(jié)果表明:
　　(1)組培條件下，ASGV和ACLSV可經(jīng)微嫁接、根系接觸、工具交叉使用、培養(yǎng)基介質(zhì)以及汁液傳毒，且傳毒幾率由高至低為:微嫁接＞根系接觸＞工具交叉使用＞培養(yǎng)基介質(zhì)＞汁液傳毒