Pin1介導高氧誘導人肺泡上皮細胞凋亡中SIRT1核-漿穿梭改變.pdf

1、四川I 醫(yī)科大學碩士學位論文本研究基金來源：1 ．中華兒科雜志第二屆雙鶴珂立蘇科研基金( 編號：c j p 一0 0 9 )2 ．四川省教育廳科研項目基金( 編號：0 8 Z A l 5 0 —0 3 3 )3 ．四川省衛(wèi)生廳科研基金( 編號：1 1 0 3 4 0 )4 ．瀘州市科技局( 瀘州市政府．瀘州醫(yī)學院聯(lián)合專項資金) ( 編號：2 0 13 L Z L Y ·- - j 0 8 )5 ．四川省科技廳項目( 編號：4

2、Z Q O l O 一0 2 3 )P i n 1 介導高氧誘導人肺泡上皮細胞凋亡中S l R 1 1 核一漿穿梭改變摘 要目的：P i n l 是人類肽基脯氨酰異構(gòu)酶，實驗組前期發(fā)現(xiàn)，P i n l 參與細胞氧化應(yīng)激通路，抑制其表達后可能夠減少高氧所造成的肺損傷，而S I R T l稱為沉默交配型信息調(diào)節(jié)因子2 同源蛋白1 ，主要定位于細胞核中，其發(fā)揮活性參與調(diào)節(jié)細胞氧化應(yīng)激過程。本實驗建立在穩(wěn)定抑制肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶( P i n

3、 l ) 表達的A 5 4 9 細胞系基礎(chǔ)上，當暴露于高氧環(huán)境下，S I R T l能否發(fā)生核一漿穿梭反應(yīng)，導致S I R T l 活性降低，抗氧化應(yīng)激能力下降，增加高氧肺損傷可能，而在抑制了P i n l 表達的A 5 4 9 細胞中能否減輕S I R T l核一漿穿梭反應(yīng)，從而減輕高氧肺損傷。方法：通過本實驗組前期實驗獲得穩(wěn)定抑制P i n l 表達的A 5 4 9 一P i n l s h R N A 細胞系。隨后將實驗分為三組：

4、對照組、高氧組，A 5 4 9 一P i n l s h R N A 組。對照組是通過含有1 0 ％胎牛血清和1 ％青鏈霉素的1 6 4 0 培養(yǎng)基中常規(guī)培養(yǎng)。高氧組及A 5 4 9 一P i n l s h R N A 組均通過通入3 L ／m i n的9 5 ％氧氣和5 ％- - 氧化碳高純混合氣l O m i n ，并在培養(yǎng)箱中密培養(yǎng)2 4 h 的高體積分數(shù)氧( 高氧) 誘導細胞。培養(yǎng)結(jié)束后收集細胞進行以下檢測：倒置相差顯微鏡下觀