促紅細(xì)胞生成素對(duì)光損傷小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞TIMP-1表達(dá)的影響.pdf

1、[目的]研究實(shí)驗(yàn)性光損傷小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(retinal pigment epithelium，RPE)中金屬蛋白酶組織抑制物-1(tissue inhibitor of metalloprotelnase-1，TIMP-1)表達(dá)的變化，以及促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin，EPO)對(duì)其的影響，探討EPO對(duì)視網(wǎng)膜光損傷發(fā)揮保護(hù)作用的機(jī)制。 [方法]52只健康成年近交系BALB/C小鼠，隨機(jī)分為單純光照組(24只

2、)、EP0處理組(24只)和正常對(duì)照組(4只)3組。其中前兩組按光照后處死時(shí)間的不同又各自分出6h、12h、36h、72h、96h和7d6個(gè)亞組，置于6000LUX光照箱中照射4h，EPO處理組小鼠光照前2小時(shí)腹腔注射重組人促紅細(xì)胞生成素(recombination human erythropoietin，rHuEPO)，劑量為5000 U/kg。采用蘇木素-伊紅(HE)染色觀察RPE細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化、免疫組織化學(xué)法檢測(cè)其TIMP-1、

3、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK-1)蛋白的表達(dá)。 [結(jié)果] (1)形態(tài)學(xué)發(fā)現(xiàn)：正常小鼠視網(wǎng)膜RPE細(xì)胞呈單線狀排列，細(xì)胞形態(tài)規(guī)整。單純光照后12小時(shí)，RPE細(xì)胞排列疏松；光照后36小時(shí)， RPE細(xì)胞明顯腫脹、邊界不清、形態(tài)不規(guī)則；光照后7天， RPE細(xì)胞出現(xiàn)丟失、雙層現(xiàn)象。EPO處理組小鼠視網(wǎng)膜組織學(xué)改變較晚發(fā)生且不明顯，并且未見(jiàn)明顯細(xì)胞丟失、雙層現(xiàn)象。 (2)TIMP-1免疫組化發(fā)現(xiàn)：正常小鼠視網(wǎng)膜RPE細(xì)胞中TI

4、MP-1弱陽(yáng)性表達(dá)。單純光照組光照后各時(shí)間段TIMP-1陽(yáng)性表達(dá)無(wú)明顯變化。EPO處理組IIMP-1較單純光照組表達(dá)明顯增強(qiáng)，光照后12小時(shí)，RPE層可見(jiàn)明顯TIMP-1陽(yáng)性表達(dá)，隨著光照后時(shí)間的推移，陽(yáng)性RPE細(xì)胞棕黃色染色強(qiáng)度遞增，光照后96小時(shí)TIMP-1表達(dá)強(qiáng)度達(dá)到高峰。 (3)ERK-1免疫組化發(fā)現(xiàn)：正常小鼠視網(wǎng)膜組織無(wú)ERK-1陽(yáng)性表達(dá)。單純光損傷后RPE細(xì)胞ERK-1表達(dá)較正常對(duì)照無(wú)明顯改變。EPO處理后，從光照后

5、6h起，各亞組均可見(jiàn)到陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞，且隨光照后時(shí)間的推移陽(yáng)性表達(dá)呈現(xiàn)逐漸遞增的趨勢(shì)，光照后72h表達(dá)強(qiáng)度達(dá)到高峰，光照后7天ERK-1陽(yáng)性表達(dá)強(qiáng)度降低。 [結(jié)論]光損傷可以造成小鼠視網(wǎng)膜RPE細(xì)胞漸進(jìn)性的破壞，同時(shí)RPE細(xì)胞TIMP-1的表達(dá)在損傷過(guò)程中沒(méi)有明顯的變化。外源性的EPO可以促進(jìn)光損傷后視網(wǎng)膜RPE細(xì)胞TIMP-1的表達(dá)的增加，有利于MMPs/TIMP平衡的恢復(fù)，進(jìn)一步證實(shí)EPO對(duì)視網(wǎng)膜光損傷的保護(hù)作用。EPO對(duì)RP