槲皮素、沒食子酸對(duì)SMMC-7721肝癌細(xì)胞PI3K-AKT信號(hào)通路影響的探討.pdf

1、研究目的：
　　 探討國(guó)醫(yī)大師經(jīng)驗(yàn)方“抗癌扶正方”中澤漆的單體槲皮素、沒食子酸在抗肝癌、促進(jìn)細(xì)胞凋亡方面的作用機(jī)制。
　　 研究方法：
　　 體外培養(yǎng)肝癌細(xì)胞SMMC-7721，順鉑為陽(yáng)性組，觀察不同濃度槲皮素、沒食子酸對(duì)細(xì)胞凋亡的作用及其相關(guān)機(jī)制。采用MTT法檢測(cè)槲皮素、沒食子酸對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，并觀察在不同時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞形態(tài)；利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)藥物作用后的細(xì)胞凋亡情況及細(xì)胞周期分布；運(yùn)用RT-PCR及Weste

2、rnBlot法檢測(cè)單體對(duì)SMMC-7721細(xì)胞PI3K/AKT信號(hào)通路相關(guān)凋亡蛋白表達(dá)的影響。
　　 研究結(jié)果：
　　 槲皮素、沒食子酸對(duì)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721增殖有明顯抑制作用，呈濃度依賴性和時(shí)間依賴性。流式結(jié)果提示，槲皮素可將SMMC-7721細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期，并且其凋亡率隨濃度增加而逐漸增加；沒食子酸可使SMMC-7721細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期，凋亡率隨藥物濃度增加的上升趨勢(shì)不顯著。細(xì)胞形態(tài)觀察

3、，藥物組細(xì)胞呈現(xiàn)不規(guī)則形，甚至變圓，體積縮小，細(xì)胞結(jié)構(gòu)沒有對(duì)照組緊密，某些細(xì)胞甚至出現(xiàn)脫落、漂浮現(xiàn)象。RT-PCR、WesternBlot凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)檢測(cè)表明，藥物組AKT的表達(dá)受抑制，PTEN、Caspase9蛋白的表達(dá)率隨著藥物濃度的增加而增加。
　　 研究結(jié)論：
　　 槲皮素、沒食子酸均能誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721凋亡，其機(jī)制可能是使細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期，PTEN的過表達(dá)抑制AKT活化，激活Casp