
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1、目的:探討P13K/AKT(磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在人肝癌細(xì)胞株SMMC-7221生長(zhǎng)和黏附中的作用機(jī)制。 方法:應(yīng)用2-(4-嗎啉基)-8-苯基-4氫-1苯并吡喃-4-酮(LY294002)作用于SMMC-7221細(xì)胞,并設(shè)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組(LY294002:5,10,20,40umol/L),MTT法檢測(cè)LY294002作用24,48,72,96 h后,對(duì)SMMC-7221細(xì)胞增殖的影響;采用腫瘤細(xì)胞-
2、基質(zhì)黏附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)對(duì)照組和干預(yù)組SMMC-7221黏附能力的變化;流式細(xì)胞儀檢測(cè)肝癌細(xì)胞黏附分子CD44s表達(dá)情況;細(xì)胞免疫化學(xué)S-P法檢測(cè)SMMC-7221細(xì)胞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、和CD44V6蛋白表達(dá)。 結(jié)果:LY294002對(duì)SMMC-7221細(xì)胞的增殖有抑制作用,呈劑量和時(shí)間依賴性;5、10umol/L的LY294002作用于肝癌細(xì)胞后與對(duì)照組
3、相比CD44S、VEGF、CD44V6蛋白表達(dá)下降(CD44S:42.84±6.35,20.21±4.5 VS 89.23±3.91,P<0.01;VEGF:103.11±18,60,68.99±15.99 VS 137.84±22.50,P<0.01;CD44V6:47.33±6.15,33.09±5.23 VS 61.36±7.39,P<0.01);5、10umol/L的LY294002干預(yù)后與對(duì)照組相比SMMC-7221黏附能力下
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