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文檔簡介
1、目的:研究異硫氰酸苯己酯(PHI)對HL-60細胞株增殖、凋亡的作用,及對HL-60細胞PI3K/Akt信號轉導通路的影響,與經典的PI3K/Akt信號轉導通路抑制劑LY294002聯(lián)合用藥,探討PHI影響PI3K/Akt信號轉導通路的可能機制。
方法:采用MTT方法繪制PHI和/或LY294002作用于HL-60細胞后的生長曲線;采用使用Annexin V/PI雙染試劑盒經流式細胞儀定量檢測細胞凋亡的變化;用蛋白免疫印跡法(
2、Western Blot)檢測HL-60細胞組蛋白乙?;疕3、H4水平及PI3K/Akt信號轉導通路蛋白表達水平的變化。
結果:(1)PHI和LY294002都能抑制HL-60細胞增殖并能誘導HL-60細胞凋亡,隨作用時間延長及濃度的增加,凋亡率逐漸上升,呈時效及量效關系,聯(lián)合用藥后變化更加明顯;(2)PHI處理HL-60細胞7小時可見HL-60細胞組蛋白H3、H4乙酰化升高,而LY294002處理后組蛋白乙?;疕3、H4水平
3、未見發(fā)生明顯改變;PHI加LY294002聯(lián)合用藥較 PHI單獨用藥組更能上調組蛋白H3、H4乙?;?。(3)PHI和LY294002均能下調HL-60細胞PI3K/Akt信號通路p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K水平,呈時效及量效變化;聯(lián)合用藥組抑制作用更加明顯。
結論:PHI和LY294002都可抑制PI3K/Akt信號通路,抑制HL-60細胞的增殖、誘導細胞凋亡。PHI可上調組蛋白H3、H4乙?;?,LY2940
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