應(yīng)用γ-H2AX分析技術(shù)評價工頻磁場對不同細(xì)胞DNA雙鏈斷裂的影響.pdf

1、目的:工頻磁場是頻率為50Hz的極低頻磁場，隨著人們接觸頻率及強度的提高，工頻磁場的生物學(xué)效應(yīng)引起了研究者的極大關(guān)注，有關(guān)工頻磁場對細(xì)胞DNA損傷修復(fù)的影響成為評價其健康風(fēng)險的關(guān)鍵事件之一，但迄今為止有關(guān)其遺傳損傷效應(yīng)的研究報道尚無確切定論。本研究采用DNA雙鏈斷裂的早期敏感指標(biāo)-γH2AX，初步評價了工頻磁場不同輻照強度和時間對三種不同系統(tǒng)或器官來源細(xì)胞的DNA損傷效應(yīng)，以期為工頻磁場敏感細(xì)胞的篩選及其進(jìn)一步的生物學(xué)效應(yīng)研究奠定基礎(chǔ)。

2、
　　 方法:將人羊膜上皮細(xì)胞(FL)、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)以及人皮膚成纖維細(xì)胞(HSF)分別暴露于50Hz，0.4mT、1mT和2mT工頻磁場15min、1h和24h后，采用γH2AX免疫熒光法和免疫印跡法分別檢測了細(xì)胞內(nèi)DNA雙鏈斷裂和γH2AX表達(dá)情況。每個強度和時間點分別設(shè)置一一對應(yīng)假暴露組，同時采用0.5μM或1μM4NQO處理1h作為陽性對照組。其中，γH2AX免疫熒光實驗采用平均焦點數(shù)、焦點陽性細(xì)胞率以及