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1、人工模擬抗體就是利用分子印跡技術(shù)制備的對(duì)目標(biāo)分子具有特異性識(shí)別能力的分子識(shí)別材料(也稱分子印跡聚合體)。人工模擬抗體制備簡(jiǎn)單,能在惡劣的環(huán)境下保持活性,性質(zhì)穩(wěn)定,成本低廉,與生物抗體相比具有顯著的優(yōu)勢(shì)。特別是作為各種快速檢測(cè)方法中的分子識(shí)別元件,在藥物及其殘留的快速檢測(cè)方面具有廣闊的前景。本文利用分子印跡技術(shù),以本體聚合法和沉淀聚合法分別制備了磺胺甲嗯唑人工模擬抗體,并對(duì)其等溫吸附、靜態(tài)吸附性能和選擇性能等特性以及初步應(yīng)用進(jìn)行了研究。
2、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明: 1.以磺胺甲嗯唑?yàn)槟0宸肿樱謩e以4-乙烯基吡啶、丙稀酰胺、甲基丙烯酸、4-乙烯基吡啶+丙稀酰胺為功能單體,以二甲基丙烯酸乙二醇酯為交聯(lián)劑,偶氮二異丁腈為引發(fā)劑,采用本體聚合法制備了一系列的磺胺甲嗯唑人工模擬抗體。除功能單體和模板分子外的其他試劑最佳用量分別為15mL乙腈、20mmol二甲基丙烯酸乙二醇酯、40mg偶氮二異丁腈。 2.以磺胺甲嗯唑?yàn)槟0宸肿樱?-乙烯基吡啶+丙稀酰胺為雙功能單體,
3、以二甲基丙烯酸乙二醇酯為交聯(lián)劑,偶氮二異丁腈為引發(fā)劑,采用沉淀聚合法制備了磺胺甲嗯唑人工模擬抗體P-1和空白對(duì)照人工模擬抗體P-2。除功能單體和模板分子外的其他試劑最佳用量分別為100mL乙腈、20mmol二甲基丙烯酸乙二醇酯、20mg偶氮二異丁腈。 3.以4-乙烯基吡啶+丙稀酰胺為雙功能單體通過本體聚合法制備的人工模擬抗體P1的識(shí)別性能優(yōu)于以4-乙烯基吡啶、丙稀酰胺和甲基丙烯酸為單功能單體制備的人工模擬抗體,對(duì)磺胺甲嗯唑有高的
4、親和性和選擇性,吸附量Q為24.4μmol/g,靜態(tài)分配系數(shù)K<,D>可達(dá)24.5mL/g,對(duì)磺胺二甲基嘧啶的分離因子α可達(dá)2.95,對(duì)克倫特羅的分離因子α可達(dá)3.89;通過沉淀聚合法制備的磺胺甲嗯唑人工模擬抗體P-1表現(xiàn)出對(duì)底物磺胺甲嗯唑較高的選擇性,靜態(tài)分配系數(shù)KD可達(dá)24.8mL/g。 4.摻雜有人工模擬抗體的敏感膜傳感器檢測(cè)電極E1表現(xiàn)出對(duì)磺胺甲嗯唑較強(qiáng)的特異識(shí)別性,且響應(yīng)快速、靈敏度較高。其中在差分脈沖法實(shí)驗(yàn)中,可以看
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