
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文檔簡介
1、目的:探討甲羥戊酸(MVA)和洛伐他汀(LOV)對人類腎小球系膜細(xì)胞(HMC)增殖的直接影響及對細(xì)胞周期的作用,從而為探討抑制系膜細(xì)胞增生的決策和他汀類藥物的多效性提供理論依據(jù)。 方法:人系膜細(xì)胞株由中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)惠贈。以1640培養(yǎng)液懸浮HMC在50 ml培養(yǎng)瓶中,37℃,5%CO<,2>培養(yǎng)箱中孵育。第一步試驗分8組:10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液為空白對照組,MVA給藥組根據(jù)濃度分為7個組(1nmol/L、10n
2、mol/L、100nmol/L、1μmol、10μmol/L、100μmol/L、1mmol/L),在48 h用MTT比色法測細(xì)胞增殖程度。對促增生最明顯的劑量組(100nmol/L)在12、24、48 h用同樣的方法測細(xì)胞增殖程度。第二步試驗分4組:正常對照組(10%FCS RPMll640培養(yǎng)液)、MVA組(100nmol/L)、LOV組(10um/LLOV)、MVA干預(yù)組(10um/LLOV+100nm/LMVA)在24,48 h
3、分別用MTT比色法檢測細(xì)胞增殖程度,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期。用酶聯(lián)免疫檢測儀檢測不同濃度MVA以及10um/LLOV以及100nm/LMVA干預(yù)作用作用下HMC在490nm波長處的光吸收(A<,490nm>)值以測定不同濃度和時間點MVA和LOV對HMC增殖的影響。用流式細(xì)胞儀測定HMC的細(xì)胞周期G<,1>(DNA合成前期)與S(DNA合成期)的比率,觀察LOV以及100nm//LMVA對HMC增殖及周期進展的影響。 結(jié)論:MV
4、A是HMC增殖的促進劑,加速細(xì)胞周期進展。LOV抑制HMC增殖,阻滯細(xì)胞周期進展,MVA可逆轉(zhuǎn)其抑制作用。 1、10-100 nmol/L范圍內(nèi)MVA是HMC增殖的促進劑,且作用呈濃度依賴性。MVA濃度過高時抑制細(xì)胞增生,考慮與致細(xì)胞毒性有關(guān)。 2、100 nmol/LMVA對HMC的增殖作用在12~48 h內(nèi)呈時間依賴性。 3、10um/LLOV抑制系膜細(xì)胞增生,且抑制作用可被100 nmol/L MVA所逆轉(zhuǎn)
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