中藥抗急性淋巴細胞白血病活性成分的研究.pdf

1、急性淋巴細胞白血病(簡稱急淋，acute lymphoblastic leukemia，ALL)是指前體B、T或成熟B細胞發(fā)生克隆性異常增殖所致的惡性疾病。目前臨床上主要采用化療的方式進行治療，用于治療的化療藥物包括烷化劑、抗代謝藥、抗生素以及激素等。雖然急淋化療方案可達到較高的五年無病存活率，但由于毒副作用較強而嚴重影響病人愈后生存質(zhì)量。急淋的中醫(yī)辨證施治及中藥治療在我國臨床上也有較多應(yīng)用。一般認為，中藥可以誘導白血病細胞分化，促進白

2、血病細胞凋亡，減輕化療過程中的副作用，同時中藥可以提高機體的免疫功能，對于消滅體內(nèi)殘存的白血病細胞和預防復發(fā)有一定的作用。但是常用急淋治療中藥大多為復方，在治療過程中起效慢，發(fā)揮治療作用的活性成分不明確。本論文旨在闡明臨床上常用于治療白血病的中藥中具有抗急性淋巴白血病活性的化合物，為抗急淋藥物研發(fā)提供先導化合物。 本論文通過文獻調(diào)研，收集了臨床用于治療白血病的復方，選擇了24味使用頻率最高的中藥，并利用三種白血病細胞株(REH人

3、急性B淋巴細胞白血病t(12；21)異位細胞、HL—60人早幼粒細胞白血病細胞、Raji人淋巴瘤細胞)，以甲氨蝶呤為陽性對照，對這24味中藥的乙醇提取物進行了體外細胞活性篩選。篩選結(jié)果顯示梔子、綿馬貫眾和半枝蓮三種中藥具有較好的抑制REH細胞株增殖的作用。然后，本文以活性篩選為指導，采用多種純化分離方法和結(jié)構(gòu)鑒定技術(shù)(IR，EI—MS，ESI—MS，1H—NMR，13C—NMR，HSQC，HMBC)分別對三種藥材的乙醇提取物中的活性部分

4、進行了分離。 在梔子的活性成分研究中，本文分離得到了8個化合物，分別鑒定為：β—谷甾醇(ZZ1)，5—羥基—7，3'，4'，5'—四甲氧基黃酮(ZZ2)，熊果酸(ZZ3)，D—甘露醇(ZZ4)，梔子苷(ZZ5)，去乙酰車葉草甙酸甲酯(ZZ6)，京尼平—1-β—龍膽苷(ZZ7)，雞矢藤次苷甲酯(ZZ8)。其中化合物ZZ3對三種白血病細胞增殖均表現(xiàn)出了一定的抑制作用，其中對REH急淋細胞系抑制活性最強，IC50值為7.5μgml/L

5、。熊果酸可能為梔子中抗急性淋巴細胞白血病的一個主要活性成分。 對綿馬貫眾的活性成分研究中得到了10個化合物，鑒定了其中8個，結(jié)構(gòu)分別是二十五烷醇(GZ1)，3—Methyl—butyrylphloroglucinol(GZ3)，3—羥基—二十七烷醇(G24)，黃綿馬酸AB(G25)，鄰苯二甲酸二丁酯(G26)，鄰苯二甲酸二異丁酯(G27)，β—谷甾醇(GZ8)，norflavaspidic acid AB(GZ9)。其中化合物G

6、Z6、GZ7為首次從該屬植物中分離得到，化合物GZ3首次從該植物中分離得到?；钚院Y選結(jié)果顯示，間苯三酚類成分均具有一定的REH細胞增殖抑制作用，可能為綿馬貫眾中抗急淋的主要活性成分，其中化合物GZ3活性最強，IC50值為8.0μgml/L，另外化合物GZ5和GZ9的IC50值分別為35.3μgml/L、32.2μgml/L。 半枝蓮的活性成分研究中分離得到了13個化合物，鑒定了其中11個化合物，結(jié)構(gòu)分別為3—羥基—二十七烷醇(B

7、ZL3)，4’—羥基漢黃芩素(BZL4)，綠原酸(BZL5)，千層紙素—A(BZL6)，柚皮素(BZL7)，漢黃芩素(BZL8)，黃芩素(BZL9)，胡蘿卜苷(BZL10)，槲皮素(BZL12)和黃芩苷(BZL13)。其中化合物BZL3和BZL6為首次從該植物中分離得到。半枝蓮中的黃酮類成分具有較好的REH細胞增殖抑制作用，因此黃酮類成分可能是抗急淋的主要活性成分，其中4'—羥基漢黃芩素的抑制活性較強，IC50值為13.9μgml/L，