黃芩等中藥的紫外指紋圖譜及黃芩苷活性研究.pdf

1、本文首先對黃芩(RadixScutellariae)等9種常用中草藥建立了紫外吸收指紋圖譜和提取物的定量測定方法,進而研究了黃芩苷對大菱鲆常見致病菌的體外抑菌效果及其對大菱鲆固有免疫的影響。
　　 主要研究結果如下:
　　 1.黃芩（RadixScutellariae）飲片加純化水浸泡后加熱水提,所得到的水提液分別通過加入乙醇沉淀精制和殼聚糖凝絮精制。結果發(fā)現,黃芩水提液、乙醇沉淀精制液以及殼聚糖凝絮精制液的紫外吸收圖譜

2、類似,在273.60nm波長處有較大吸收峰,在312.40nm處有較小吸收峰,而在224.30nm和308.12nm處有最小吸收。
　　 以最大吸收峰為固定波長,測定不同濃度梯度黃芩提取液的紫外吸收值,發(fā)現生藥濃度與紫外吸收值呈良好的線性關系,其回歸方程為y=4.2857x,R2=0.9986。
　　 上述結果表明,黃芩飲片經水煮提取,以及經過不同精制方法處理后,其紫外吸收圖譜可以作為黃芩定性鑒別的依據,而根據線性方程可

3、進行黃芩提取物的定量檢測。
　　 對黨參(Radixcodonopsitis)、黃芪（RadixAstragali）、金銀花(FlosLonicerae)、蒲公英(HerbaTaraxaci)、忍冬藤(CaulisLonicerae)、大青葉(FoliumIsatidis)、甘草(RadixGlycyrrhizae)、貫葉連翹(FructusForsythiae)等8種中草藥飲片的研究也得到類似的結果,但不同種類的中藥,其紫外吸

4、收峰的位置以及回歸方程有差異。
　　 2.本文第二部分研究了黃芩苷對大菱鲆常見致病菌的體外抑菌效果,以及黃芩苷對大菱鲆固有免疫相關酶活性的影響。
　　 (1)黃芩苷對大菱鲆的常見致病菌:鰻弧菌(Vibrioanguillarum)、大菱鲆弧菌(Vibrioscophthalmi)、哈維氏弧菌(Vibrioharveyi)和愛德華氏菌(Edwardsiella)的體外抑菌試驗使用了兩種方法:
　　 ①牛津杯法。將黃

5、芩苷配成從100到100000ppm梯度的藥液,測得黃芩苷對鰻弧菌、大菱鲆弧菌、哈維氏弧菌和愛德華氏菌的MIC分別為500ppm、1000ppm、500ppm和500ppm,抑菌圈大小分別為16.9±5.1mm、12.7±2.0mm、22.6±6.3mm和14.2±2.8mm。
　　 ②菌落計數法。0-500ppm黃芩苷有抑菌作用而非殺菌作用。黃芩苷500ppm時,鰻弧菌、大菱鲆弧菌、哈維氏弧菌和愛德華氏菌的菌落數分別比對照組降

6、了79.77％,86.61％,55.34％,46.87％。即:黃芩苷對病原菌的抑菌能力:大菱鲆弧菌＜鰻弧菌＜愛德華氏菌＜哈維氏弧菌。
　　 (2)將黃芩苷按0％、0.75％、1.5％、3％的比例拌入餌料,投喂大菱鲆。于0d、5d、15d、20d、25d、30d、35d、40d時抽取尾靜脈血測定血清溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)和堿性磷酸酶(AKP)的活性,發(fā)現:
　　 ①黃芩苷(0-3％

7、)對LZM活性存在劑量效應。且LSZ活性隨時間先升高后降低,在30天有最大值,此時對照組LSZ活性為0.952±0.067ug/ml,黃芩苷組為1.203±0.054、1.305±0.043和1.507±0.062ug/ml。
　　 ②黃芩苷對SOD活性影響不明顯。前15天黃芩苷組SOD活性高于對照組,有劑量效應,SOD最高值為36.46U/ml（高濃度組）。但在25天后低于對照組,且SOD活性在各組間無明顯變化,認為存在免疫疲