砷致學(xué)習(xí)記憶能力損害與海馬c-jun、BDNF表達(dá)變化的關(guān)系研究.pdf

1、目的：
　　本研究以大鼠為模型，通過(guò)飲水染毒，建立亞慢性砷中毒模型，觀察砷暴露對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力影響、對(duì)大鼠腦海馬 c-jun及 BDNF表達(dá)影響，以探討砷致學(xué)習(xí)記憶損害的機(jī)制，為砷中毒預(yù)防和治療提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　1，采用40只清潔級(jí)SD大鼠（體重：100±20g）,隨機(jī)分為4組,每組10只，雌雄各半。在清潔級(jí)動(dòng)物房?jī)?nèi)飼養(yǎng)。以自由飲水方式染毒，染毒組飲亞砷酸鈉水溶液，染毒組劑量為：2.4mg/L，12mg

2、/L，60mg/L，對(duì)照組飲蒸餾水，每天更換飲用水一次，染毒100天。每周稱一次體重。染毒結(jié)束前6天，采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠行為學(xué)改變。染毒結(jié)束后乙醚麻醉，處死大鼠，冰浴斷頭分離腦組織，-70°冰箱保存。
　　2，指標(biāo)測(cè)定：采用電感耦合等離子體發(fā)射光譜法（ICP-AES測(cè)定腦總砷含量；Morris檢測(cè)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶改變；實(shí)時(shí)熒光定量（qRT-PCR）測(cè)定海馬c-jun mRNA、BDNF mRNA；免疫組化法檢測(cè)JU

3、N蛋白水平；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測(cè)海馬BDNF蛋白含量。
　　3數(shù)據(jù)處理：數(shù)據(jù)經(jīng)Excel雙人錄入，spss17.0統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：
　　1，大鼠生長(zhǎng)變化：實(shí)驗(yàn)期間，染毒組大鼠出現(xiàn)輕微的中毒征表現(xiàn)為脫毛、嗜睡、反應(yīng)遲鈍，高中劑量個(gè)別出現(xiàn)腦偏癱征。各組大鼠在100天染毒期間，體重變化差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。而從大鼠體重變化趨勢(shì)圖可發(fā)現(xiàn)，高劑量組大鼠在染毒第7周開(kāi)始體重較其他組小，體重出現(xiàn)增幅減慢

4、的趨勢(shì)。
　　2，大鼠腦重系數(shù)與腦砷：各組大鼠腦重系數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。染砷程度不同，染毒組腦砷含量較對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），各組間比較，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　3，大鼠學(xué)習(xí)記憶能力改變：定位航行實(shí)驗(yàn)：隨染毒劑量增加，空間記憶能力損害加重。與對(duì)照組比較，染砷組大鼠逃逸潛伏期延長(zhǎng)，從游泳訓(xùn)練第三天結(jié)果發(fā)現(xiàn)，高劑量組大鼠潛伏期與對(duì)照組及低劑量組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<

5、0.05），該差異延續(xù)到第四天。而低劑量組與中劑量組較對(duì)照組，差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）?？臻g探索實(shí)驗(yàn)：隨著染砷濃度的增大，各劑量組大鼠在原平臺(tái)象限停留時(shí)間縮短，高劑量組與對(duì)照組、低劑量組及中劑量組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在平臺(tái)象限的游泳距離隨劑量增加而減少，其中高劑量組與對(duì)照組、低劑量組、中劑量組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），中劑量組與對(duì)照組比較，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而低劑量組較對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)

6、意義（P>0.05）；在穿越平臺(tái)結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，隨劑量改變，穿越平臺(tái)次數(shù)依次減少，其中高劑量組與中劑量組較對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），低劑量組較對(duì)照組，染毒組間兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　4，腦海馬c-jun表達(dá)改變：隨著劑量增加，腦海馬JUN蛋白表達(dá)增加，而c-jun mRNA表達(dá)下調(diào)。染毒組JUN蛋白的表達(dá)較對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）各組間多重比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。

7、c-jun mRNA的相對(duì)表達(dá)定量中，高劑量組較對(duì)照組表達(dá)量相對(duì)較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　5，腦海馬BDNF表達(dá)改變：染毒組BDNF蛋白及其mRNA的相對(duì)量表達(dá)均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）其中高劑量組和中劑量組 BDNF蛋白表達(dá)與對(duì)照組、低劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；高劑量組BDNF mRNA的相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組相對(duì)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：